脱细胞组织的低温研磨：一种制备细小细胞外基质粉末的技术

低温研磨或称冷冻研磨是一种可将脱细胞组织样本冷却至极低温度并研磨成细粉，同时保持其生物化学成分的技术。 

首先，获取目标组织来源的冻干脱细胞细胞外基质（ECM）。将其切碎，得到小片段。

接下来，将切碎的细胞外基质（ECM）片段转移至研磨罐中。向研磨罐中加入研磨球。将装有样品的研磨罐浸入液氮中，使样品在 −196 °C 下冷冻。

将冷却后的研钵装入冷冻研磨系统中。对冷冻样品在适当的频率下进行预定时间的冷冻研磨处理。

在冷冻研磨过程中，研磨罐在水平位置上进行径向振荡。因此，研磨球的惯性使其能够以高能量撞击研磨罐圆端处的冷冻样品，并将其粉碎。

此外，研磨罐的运动与研磨球的运动相结合，可促进样品的充分混合，从而获得粒径分布均匀的细粉。

现在，将冷冻研磨后的ECM粉末转移至玻璃小瓶中。密封小瓶以防止接触湿气，并将样品干燥保存至后续使用。

使用锋利的手术剪将脱细胞组织精细剪碎。为了进行冷冻研磨，将剪碎的冻干 ECM 装入实验室球磨机系统的 25 毫升不锈钢研磨腔中，并加入两个 10 毫米的不锈钢研磨球。

将装好的研磨腔室关闭并完全浸入液氮中 3 分钟。然后以 30 赫兹频率研磨冷冻样品 3 分钟。重复浸入液氮和研磨过程，直至细胞外基质（ECM）被研磨成细粉。