通过冷冻干燥法由细胞外基质制备泡沫材料:一种利用脱细胞组织细胞外基质生成生物支架的方案 细胞外基质,脱细胞组织,生物支架,冷冻干燥,组织工程,泡沫材料

0 次观看2:31 分钟 • April 30th, 2023

由ECM制备的泡沫材料是利用细胞外基质——组织微环境中的一种非细胞成分——获得的高孔隙率支架。

为了制备一种由细胞外基质(ECM)衍生的泡沫材料,首先取装有超细ECM粉末均匀悬浮液的离心管。在较高温度下孵育该悬浮液,并持续搅拌,以防止ECM结块。

接下来,使用注射器将液化的细胞外基质(ECM)悬液转移至所需的模具中。将模具置于冰箱中过夜,使ECM凝固。ECM会固化形成三维网络结构。

最后,将含有固体 ECM 的模具放入冻干机瓶中。将瓶子连接至冷冻干燥系统。在冻干机内部,样品暴露于极低温度和低压环境中,这会导致 ECM 网络的间隙空间中形成冰晶。

随着时间推移,冻干机内的压力和温度逐渐升高。这些条件促进了升华过程——即物质从固态直接转化为气态,而无需经过熔化阶段。

气态蒸汽蒸发后,在细胞外基质网络内部留下空隙,从而形成多孔的细胞外基质来源支架。

将ECM悬液在37摄氏度下孵育,同时以120 rpm持续振荡,直至悬液变暖。然后,使用0.2摩尔乙酸将样品悬液稀释至所需浓度。用3毫升注射器和18G针头,将ECM悬液注入所需模具中。

可根据模具的形状制备出多种几何形态的泡沫。将模具盖好,并在负20或负80摄氏度下冷冻。然后将模具放入冻干瓶中。将瓶子连接至实验室冷冻干燥系统,干燥24小时或直至完全干燥。