0 次观看 • 3:00 分钟 • April 30th, 2023
在啮齿类动物中,肾脏具有一层称为肾包膜的保护性纤维外层,其表面还覆盖有一层肾周脂肪。为了提取小鼠肾脏并去除周围组织,首先将已实施安乐死的小鼠仰卧位放置于手术台上。
切开腹部皮肤和肌肉层,继续做纵向切口直至暴露腹腔。然后找到肠管并轻轻提起,从肠管下方剪开并将其从鼠体中移除,以暴露肾脏。
接下来,找到输尿管并剪除其下方的结缔组织,使肾脏与腹腔分离。分别切除两侧肾脏。将取出的肾脏置于含有冰冻缓冲液的培养皿中,并在解剖显微镜下进行观察。
现在,去除肾脏周围的肾周脂肪,以暴露肾盂(输尿管起始端漏斗状扩张的部分)。从肾盂基底部剪除一部分,以去除残留的输尿管组织。
最后,浅表穿刺外层纤维性肾包膜。利用所形成的切口,仔细将整个肾包膜从肾脏表面剥离。这有助于去除附着在肾包膜上的肾上腺——一种内分泌腺体——并获得完整的肾脏。
使用内用组织镊和内用解剖剪,夹住肠管并将其从腹壁提起。同时,在近端十二指肠和远端结肠处剪开肠管的下方,使其与体部分离,从而暴露包含肾脏的腹膜后腔隙。
用组织镊轻轻夹住输尿管远端并提起。使用解剖剪在被夹住的输尿管下方朝肾脏方向剪开,直至将其从周围结缔组织中游离出来。暴露肾脏后,逐一取出。
用冰冷的KRB溶液填充硅胶弹性体涂层培养皿。将肾脏转移至解剖皿中,并确保其完全浸没。使用精细弹簧剪刀和内用镊子去除肾脏基部的脂肪组织,以暴露远端肾盂(RP)和近端输尿管。
使用精细的弹簧剪刀和镊子从基部切除近端输尿管及部分远端 RP。用尖头镊子刺穿外层肾包膜,镊尖朝向远离肾实质的方向倾斜。双手各持镊子,夹住包膜松动的两端,将其撕开,直至完全去除残留的肾包膜组织。