0 次观看 • 3:14 分钟 • April 30th, 2023
为制备小鼠肾脏的薄切片，首先获取新鲜摘取的小鼠肾脏。将肾脏转移至滤纸上，吸干以确保其能良好地黏附于振动切片机的样品台。
接下来，将肾脏的输尿管面朝下，用一层薄薄的氰基丙烯酸酯胶水粘附在振动切片机样品架的底部，使肾脏保持直立位置并固定。然后将样品架转移至缓冲液托盘中。
用适当的缓冲液填充托盘，使肾脏的上表面完全浸没。托盘周围放置冰浴，以防止切片过程中因产热导致组织损伤。将振动切片机的刀片设置为合适的角度、速度和振幅。调节厚度参数，以获得所需厚度的组织切片。
在操作过程中，刀片进行横向振动并向前推进，穿透组织样本。振动的刀片可在较低压力下完成切片，减少组织变形，在保持组织形态的同时获得均匀的肾组织切片。
同时，准备一个含适当冷缓冲液的多孔板，以模拟组织的生理条件。随后，将切好的组织切片转移至缓冲液中。最后，将组织切片置于低温下保存，直至进行后续下游分析。
使用平头镊子轻轻夹取并从冰冻的KRB溶液中取出已准备好的肾脏。立即将肾脏放置在吸水纸上约2至4秒，以去除表面多余的水分。轻轻滚动肾脏，使肾实质的各个面均与吸水纸接触干燥，以确保肾脏与振动切片机载物台之间达到最佳黏附效果。
立即在振动切片机样本板的底部涂上一层薄薄的氰基丙烯酸酯胶水，用钝头镊子将肾脏的输尿管侧朝下放置在涂有胶水的区域。用镊子的平边轻轻向下按压肾脏顶部约10至20秒，使胶水干燥。
将标本板牢固地固定在缓冲液托盘底部，并调整KRB溶液的液面高度，使肾脏顶部完全浸没。进行自动振动切片时，选择振动切片刀切割循环的起始和终止位置，距离肾脏0.5至1厘米，以确保整个肾脏平面被切片。
启动自动切片过程，确保刀片与肾脏接触。使用镊子收集从肾脏上分离下来的切片，并立即转移到各个孔中。