建立小鼠正位膀胱肿瘤模型：将癌细胞经膀胱内灌注植入小鼠膀胱的操作步骤 关键词：正位肿瘤模型，膀胱肿瘤，小鼠模型，膀胱内灌注，癌细胞植入

膀胱内灌注可促进癌细胞递送至受体动物的膀胱内。首先，将一只麻醉的雌性小鼠仰卧位固定在加热垫上以调节其体温。排空膀胱内的尿液。

接下来，组装连接至含有聚-L-赖氨酸（poly-L-lysine）或PLL溶液的注射器的导管。润滑导管尖端，以确保顺利插入尿道并进入膀胱。插入后，缓慢将PLL溶液注入膀胱。

缓慢输送聚-L-赖氨酸（PLL）可防止膀胱输尿管反流——即尿液从膀胱逆流至输尿管和肾脏。在导管上放置堵头，以防止过早外流。注射的带正电荷的PLL分子与膀胱内壁上带负电荷的糖胺聚糖涂层相互作用并附着于其上。

移除导管，排空膀胱中未结合的PLL溶液和尿液。使用另一套导管-注射器装置，缓慢将冰冷的癌细胞悬液注入膀胱，以防止发生膀胱输尿管反流及随之而来的肾脏细胞植入。将导管上的塞子固定。

糖胺聚糖层表面电荷的改变增强了其与癌细胞的静电相互作用，促进癌细胞黏附。移除导管并排空膀胱内未黏附的癌细胞和尿液。随着时间推移，植入膀胱内的癌细胞增殖并形成原位肿瘤。

雌性小鼠麻醉后，通过腹腔注射给予哈特曼溶液，剂量为每10克体重0.1毫升，以补充水分。在麻醉期间，每隔一至两小时重复一次。

接下来，将无菌眼膏涂抹于双眼。根据需要重复涂抹。然后，将小鼠仰卧置于加热垫上的纸巾上，以维持体温。接着，用胶带固定后肢。现在，对下腹部区域施加轻柔压力，并将尿液收集至1.5毫升离心管中。

接下来，用无菌的PLL填充一支1毫升注射器，并连接一个已移除针芯的24号静脉导管。在导管尖端涂抹润滑剂。然后将导管插入尿道，并用镊子引导其进入膀胱。当感到阻力时停止推进。随后，以每20秒注射10微升的速度缓慢注入50微升PLL，以避免发生膀胱输尿管反流。

现在，用堵头封闭导管，使其在膀胱内留置20分钟，以防止液体流出。20分钟后，拔出导管，并通过轻柔按压下腹部排空膀胱内的所有内容物。然后，使用1毫升注射器将导管内任何残留物冲洗干净。

现在，用移液器充分混匀 MB49-PSA 细胞，并将其加入 1 毫升注射器中。连接导管并按之前方法进行润滑。将导管插入膀胱，同前操作，以每 20 秒缓慢推出 10 µL 的速度开始注射细胞。随后，等待 1 小时。

一小时后，拔除导管并排空膀胱内所有内容物，随后释放小鼠。将其置于腹侧卧位，并通过注射阿替美唑使其苏醒。随后密切监测小鼠，直至其恢复胸骨卧位，然后将其放回原饲养笼中。