水动力肾盂注射：一种将DNA直接递送至小鼠模型肾细胞的技术

为了将质粒 DNA 直接递送至小鼠肾细胞，首先将麻醉后的小鼠置于侧卧位。去除小鼠侧腹部的背部毛发以进行术前准备。在肋骨下方的左侧腹侧找到合适的切口位置。

在皮肤及下方肌肉层上做一个小切口。接着，轻柔按压腹腔，使肾脏从切口处暴露。部分去除覆盖在肾脏表面的肾周脂肪组织，以观察肾盂。

现在，取一支含有质粒DNA的注射器，其中溶剂为水动力递送缓冲液。将针头直接插入肾脏肾盂——即肾脏中输尿管的三角形扩张部分。快速注射质粒溶液，使DNA直接进入肾实质——即肾脏中负责过滤血液的功能部分。

通过肾盂快速输送大量液体可产生高压，在肾实质细胞的细胞膜上形成瞬时孔隙。这有助于质粒进入细胞。最终，这些孔隙闭合，将质粒截留在细胞内。

最后，撤出针头，并将肾脏放回腹腔内。缝合切口处的皮肤和肌肉层。

戴上无菌外科手套，从切口侧开始，用新的氯己定/酒精棉签以环形动作擦拭动物三次。现在确定切口位置。用镊子夹起皮肤，使用剪刀在肋骨下方脊柱约1厘米处剪开皮肤层。在下方的肌肉层再做一次居中切割。找到肾脏，在不触碰肾脏的情况下，用手指对腹部施加稳定而轻柔的压力，将肾脏从腹腔中轻轻暴露出来。

暴露肾脏有时较为困难。应轻柔地对腹部和脊柱施加压力，以避免损伤脾脏。如果除肾脏外的其他器官脱出，必要时可用闭合的镊子轻轻将其还纳回体腔内。

然后，轻轻将肾脏与周围脂肪组织分离，直至能够看到肾盂，肾盂呈现为一个微小白点。观察到肾盂后，用闭合的镊子轻压肾脏右侧，以保持肾盂处于视野中。接着，右手握住已装液的胰岛素注射器，使其与操作台面平行，小心地将针头插入肾盂内。

针头插入后，需在3秒内快速注射溶液。让针头原位停留约10秒，以防止溶液回流。随后，缓慢而小心地拔出针头，并用闭合的镊子轻轻牵拉切口部位，将器官复位至腹腔内。接着，使用5-0可吸收缝线缝合肌肉层，并打2至4个独立结。同样，使用5-0或6-0不可吸收尼龙缝线缝合皮肤层，并打2至4个独立结。