小鼠脑室内注射:一种经Ommaya导管向小鼠脑室直接给药的药物递送方法

0 次观看3:24 分钟 • April 30th, 2023

在软脑膜疾病中,来自其他器官的癌细胞会转移至软脑膜内的脑脊液(CSF)中,软脑膜是包裹大脑的薄层组织。

脑室内注射可实现药物直接进入脑脊液,从而避开血脑屏障。

首先,将一只麻醉后的小鼠置于俯卧位。

切开头部以暴露颅骨。找到前囟——冠状缝与矢状缝的交汇点。

使用微型钻头,在距前囟适当距离处的颅骨上钻孔,以接触最外层的致密结缔组织脑膜——硬脑膜。

然后,将奥马雅囊(一种小型注射端口)轻柔地插入孔中。

操作完成后,缝合周围皮肤,并让Ommaya囊固定在最佳时长。

接下来,将装有所需药物混悬液的注射器连接至Ommaya储液囊。

设定合适的流速后,将药物混悬液注入硬脑膜。

Ommaya囊为直接将药物输送至脑室中的脑脊液提供了无菌通路。

现在,取下注射器,将Ommaya导管保留在颅骨内,以备后续给药。

让小鼠恢复。

随着时间推移,药物分子会迁移至癌症病灶部位,抑制癌细胞的生长与增殖。

使用25G微型注射端口和1毫米间隔盘组装小鼠Ommaya注射装置。

使用氰基丙烯酸盐无菌粘合剂,确保金属套管插入右侧大脑半球约 2.5 毫米,并按照无菌技术准备皮肤。

做一个小的皮肤切口,随后钝性分离皮下组织以暴露颅骨。使用浸有双氧水的棉签擦拭颅骨以使其干燥。

在颅骨上钻一个直径0.9毫米的钻孔,位置位于前囟后0.5毫米、外侧1.1毫米处,以暴露硬脑膜。

将微型钻移开,轻轻划刻环钻孔周围区域的骨面。使用无菌氰基丙烯酸酯粘合剂将注射端口固定在颅骨上,并将其插入至约2.5毫米深度。

使用4-0不可吸收尼龙缝线,以间断缝合或荷包缝合方式缝合切口。术后将小鼠单独饲养于笼中以供恢复。

给药时,使用穿刺适配器和汉密尔顿注射器接触小鼠颅内储液囊。用镊子夹住微型注射端口的顶部,轻轻将穿刺适配器完全插入端口的隔膜中。

注射完成后,用镊子将小鼠Ommaya导管从端口注射适配器上分离。