0 次观看 • 4:40 分钟 • July 8th, 2025
血脑屏障(BBB)由紧密排列的内皮细胞组成,这些细胞通过紧密连接相互连接。这形成了一道致密的屏障,限制了分子向脑组织的移动。为了穿透血脑屏障,先将一只麻醉小鼠固定于立体定位仪上,使其呈俯卧位。
接下来,将导管插入尾静脉,并用抗凝剂溶液冲洗以防止血液凝固。取含有微泡的悬液——即气体被包裹在脂质层内的微球。将微泡注入尾部侧静脉。这些微泡进入血流后,最终到达大脑。
随后,确定脑部位置,并在头部相应区域涂抹超声耦合剂,以改善声波传导效果。将超声换能器植入小鼠头部指定区域,利用该换能器施加强而精准的超声波。
由于超声波产生的声学压力,微泡会迅速多次膨胀和收缩。这些振荡导致声致通透性——破坏内皮紧密连接——从而在血脑屏障(BBB)上形成局部开口。这些开口促进了微泡向脑组织的递送。
最后,将含有染料的溶液经血管内注射。染料分子通过血脑屏障上的短暂开放孔隙从血管中渗出。若在小鼠脑组织中检测到染料,表明声穿孔成功。
为了进行微泡注射以开放血脑屏障,插入26至30号尾静脉导管,并用少量肝素溶液冲洗静脉。使用组织胶带固定导管,防止脱落。若导管插入成功,需用肝素溶液充满导管,以避免血液凝固。
将动物放置在温度可控的立体定位平台上,以避免低体温。使用咬合杆和耳杆固定动物头部,并用胶带将尾巴和导管固定在平台上。用绑带固定小鼠的身体。
将装有小鼠的立体定位平台置于成像设备中,对动物进行成像。确定动物在平台上的位置是否正确。结合换能器焦点位置,利用多模态定位标记物和图像处理流程标记动物的位置。通过在获取的X射线图像上叠加脑轮廓,或利用生物发光成像(BLI)图像确定肿瘤中心,从而确定靶区。
在放置换能器之前,用胶带保护动物的鼻孔和口腔,以防止超声耦合剂影响呼吸。在小鼠头部涂抹超声耦合剂,以确保良好的声传导。将针式水听器置于枕骨附近,记录微泡空化信号。
根据校准值,将换能器引导至动物上方的正确位置。对所有连接的设备应用预设参数,以靶向目标脑区。换能器放置到位后,按照制造商的说明溶解并激活微泡。
在注射微泡前,用生理盐水冲洗尾静脉导管以确认尾静脉通路通畅。启动超声辐照轨迹的同时注射微泡。此时,针式水听器将实时检测并验证微泡的空化效应。如需要,可在声孔效应后给予血管内对比剂或药物。持续监测动物直至达到预定的时间点。