0 次观看 • 5:11 分钟 • July 8th, 2025
神经周围侵犯是一种罕见的转移现象,指肿瘤细胞从原发部位转移并侵入神经内的神经周围间隙。神经微环境为肿瘤的生长和增殖提供了适宜的条件。
为了在体内模拟神经周围侵袭,将一只麻醉小鼠置于俯卧位。在股骨下方做一个小的平行切口。分离大腿肌肉以暴露坐骨神经——这是体内最大且最容易接近的神经。
坐骨神经起源于下部脊柱,穿过骨盆肌肉到达每条腿,负责传递下肢协调运动的信号。接下来,去除神经周围的肌肉,并使用无菌刮勺将神经向外牵拉,以便进行注射操作。
现在,取一支装有癌细胞悬液的注射器,平行于神经注射。若神经出现可见的膨隆,则表明注射成功;若注射部位周围有液体渗漏,则表明注射失败。短暂等待,使细胞在神经内稳定。
然后,轻柔地撤出针头并复位肌肉组织。接着缝合切口。让小鼠恢复。最终,癌细胞开始从注射部位向脊髓方向迁移,证实发生了神经周围浸润。
手术前一天,使用手术剪或化学脱毛剂去除8周龄雄性或雌性C57BL/6J小鼠股骨背侧全长的毛发。手术当天,对操作台进行消毒,将小鼠置于诱导室中用2%异氟烷麻醉,并在眼睛上涂抹兽用眼膏,以防止麻醉期间角膜干燥。
根据体重皮下注射适当剂量的镇痛剂,并将小鼠转移至手术区域的鼻罩中。整个手术过程中提供加热支持。将麻醉后的小鼠置于腹侧卧位,使用低致敏性胶带轻轻固定每只肢体,以在待注射肢体上产生轻度张力。
用碘伏棉签清洁注射部位,然后用70%酒精再次清洁。重复此过程两次,并确保手术区域无松散毛发残留。最后一步,将碘伏溶液涂抹于手术区域。戴上无菌手套并铺好无菌巾后,使用专用的无菌工具在无菌巾下方进行足趾夹捏,然后开始切口。
然后,使用无菌的小剪刀在股骨下方约2毫米处平行于股骨做一1厘米长的切口。用镊子将皮肤向外侧牵拉,以暴露下方的肌肉。沿筋膜平面分离臀大肌和股二头肌,暴露其下方的坐骨神经。用钝性分离法将神经从周围肌肉组织中游离出来。
从沉淀物中吸取3微升癌细胞至无菌的10微升注射器中。在注射部位的神经下方放置一小块金属刮刀以提供支撑。在体视显微镜下观察,保持针头与神经平行,并将其插入神经内。注意避免刺穿神经背面。
在5秒内缓慢将细胞注入神经。注射区域形成膨大提示注射效果良好。拔出针头前,将针头留置3秒,以尽量减少回流,然后轻柔地取出针头。坐骨神经内正确注射癌细胞至关重要。若细胞被注射至神经外,侵袭的一致性将受到影响。然而,通过练习和经验积累,这种情况极为罕见。
注射后,将神经复位至原始位置,并用覆盖的肌肉将其覆盖。对小鼠给予适当的镇痛处理,然后用5-0尼龙缝线缝合皮肤。将小鼠单独置于洁净的笼子中观察,并在恢复期间提供保温支持,直至其恢复足够的意识以维持胸卧位。