0 次观看 • 6:47 分钟 • July 8th, 2025
首先,将一只麻醉后的小鼠置于仰卧位。在其颈部做一纵向切口,并移开唾液腺。接着,分离包裹带状肌的筋膜(一种结缔组织层),以暴露其下方的气管。
经口腔插入气管插管,并通过切口确认插管准确进入气管。将插管连接至已设定好所需参数的呼吸机,以提供充分的通气支持给小鼠。
现在,将小鼠置于右侧卧位。在左侧胸肌之间切开皮肤并分离筋膜。将呼吸机调整为呼气末正压(PEEP)模式。
在第三肋间行左侧开胸术——切口位于第三和第四肋骨之间。PEEP 模式下气道内的正压可避免开胸术期间肺泡塌陷。
暴露心脏后,去除心包膜。辨认左前降支(LAD)冠状动脉——这是一条从左冠状动脉分出的鲜红色血管。LAD 动脉为左心室的大部分区域提供血液供应。
在外科手术中结扎左心房近端的前降支动脉。结扎前降支动脉会导致心室变白。缝合切口,将动物放回笼中。永久性前降支动脉结扎会阻断心肌的血液流动和氧气供应,导致心肌损伤和死亡。
使用电动剃须刀快速剃除一只25至30克重的雄性C57BL/6小鼠喉部及左侧肋骨区域的毛发。通过脚趾夹捏确认小鼠无反应。在小鼠眼睛上涂抹眼膏。将小鼠仰卧置于加热垫上,并在头部下方放置一小块纱布垫,以避免眼睛过热。
用胶带固定四肢。将5-0丝线穿过上切牙下方形成环状,将线环末端固定在加热垫上,以在插管期间保持口腔张开。在预先剃毛的区域涂抹脱毛膏,并用棉签轻轻按摩1分钟。
用纱布去除多余的毛发和药膏,并用数滴0.9%生理盐水和纱布清洁暴露的皮肤。将无菌纱布片贴在剃毛后的喉部和胸部,并用碘伏浸湿纱布。将呼吸机设置为潮气量7毫升/千克,通气频率140次/分钟。
将小鼠置于显微外科立体显微镜下。抓住喉部中央的皮肤,沿尾侧/头侧方向做一条0.5厘米长的切口,并分离唾液腺的叶。使用弯头镊子轻轻分离胸骨舌骨肌的筋膜,直至可见喉部和气管。然后,用连接在弹性带上的牵开器固定切口边缘。
接下来,轻轻将舌头向一侧牵拉,用镊子将16号套管的钝化内针插入气管。通过颈部切口观察内针是否正确进入气管,随后将套管连接至呼吸机。将浸有碘伏的无菌0.9%氯化钠溶液纱布覆盖于切口处,以保持手术过程中组织湿润。
然后,将排气管插入水中。若有气泡产生,则表明插管成功。对于左前降支冠状动脉(LAD)的结扎,小心地将小鼠移至右侧卧位,并在新体位下重新固定左侧前肢。
辨认左侧胸小肌与胸大肌之间的分界线,并沿该线做一长约1厘米的斜行皮肤切口。使用钝性分离显微剪刀,在不切开组织的情况下分离胸肌的筋膜,并使用连接在弹性带上的牵开器保持分离状态。
将呼吸机设置为3厘米水柱的呼气末正压。使用钝头镊子在第三和第四肋骨之间的第三肋间隙处打开胸腔。将两个牵开器插入肋骨笼中,分别置于每侧肋骨上,并使用弯头精细镊子小心去除心包膜,避免损伤心脏和肺部。
将左前降支(LAD)定位为一条从左心耳边缘向心尖延伸的浅表鲜红色线条。使用持针器在左心房下方2至3毫米处,将一根7-0丝线穿过左前降支下方。缓慢牵拉丝线以避免撕裂心脏组织,用三个结扎紧结扎线。结扎后,左心室的左下部将立即变为苍白。
现在,松开肋骨牵开器,用镊子夹住第三根肋骨,在第三和第四根肋骨下方用6-0丝线穿过两次。在切口处滴加三滴37摄氏度、0.9%的生理盐水溶液,并关闭呼气排气管2至3个呼吸周期,以充分扩张肺部。
用两道结扎紧并固定缝线,然后松开牵拉肌肉的牵开器,帮助肌肉恢复到正确的解剖位置。接着,使用两针和两道结的5-0缝线丝线缝合胸部皮肤。再用一针5-0缝线丝线和两道结缝合 throat 皮肤。