劳力性热射病小鼠模型：研究劳力性热射病潜在机制的实验方案

劳力性热射病（EHS）是由于在高温高湿环境下进行体力活动过度，导致体温迅速升高，进而引起神经功能障碍和多器官损伤所致。

为了建立热射病（EHS）的临床前模型，使用植入遥测设备的小鼠，该设备可连续监测核心体温。将小鼠放入配备强制跑轮和温度监测装置的人工气候舱中。

将温度调节至室温水平，使小鼠适应代谢笼环境。待小鼠状态稳定后，记录其体重。随后，将代谢笼的温度和湿度调节至目标水平。同时，在代谢笼周围设置遮光帘，以减少光照干扰。

当舱室达到目标条件后，迅速打开舱门并将小鼠放置于强制跑轮上。开始转动跑轮并逐渐增加转速。由于运动，小鼠的体温会上升。当小鼠达到最高核心温度后，保持跑轮转速恒定。

观察小鼠出现疲劳迹象后停止转轮。随后将小鼠从人工气候室中取出并称重。将小鼠转移至其饲养笼中，并让其在室温环境下恢复。

在进行劳力性中暑实验方案的前一晚，将小鼠置于环境舱内，保持室温以适应舱内环境。使用数据采集系统持续收集核心体温（Tc），并以每30秒为间隔取平均值，整夜监测。在劳力性中暑实验方案当天早晨，确保小鼠的核心体温处于或低于昼夜正常体温范围（36至37.5摄氏度），然后再升高舱内温度，以确保小鼠在此期间无发热或未经历过度应激。

当小鼠状态稳定且核心体温处于正常静息范围时，移除食物和水，并称量动物体重。关闭舱门，将舱内温度升至目标值37.5摄氏度，相对湿度调至40%至50%，或设定为所需的环境温湿度。使用经校准的温湿度监测仪确认舱内温度和湿度。

使用遮光帘将实验舱周围包围，以在实验过程中尽量减少光线和干扰。通过远程红外照明摄像头在整个实验过程中持续监测小鼠。将第二个摄像头对准放置在跑轮附近的温湿度监测仪。调节环境舱控制器的设定值，确保动物周围区域的温度读数准确。

当温度监测仪上的第二台相机测得腔室达到目标温度后，迅速打开腔室门，将小鼠放入强制跑轮中。启动强制跑轮程序，初始速度为 2.5 米/分钟，之后每 10 分钟增加 0.3 米/分钟，直至小鼠核心温度达到 41 摄氏度。

达到核心温度后，保持转速恒定，直至出现症状性限制，表现为明显意识丧失、向后跌倒或晕厥，以及无法继续奔跑或抓握转轮。确认小鼠在转轮上连续向后翻转三次且无任何身体反应的时间点。或者，根据当地IACUC规定确定人道终点，以判断何时终止实验方案。该终点在几乎所有小鼠中均略高于症状性限制点。

为执行快速冷却方案，在小鼠达到症状限制时停止转轮，并立即将小鼠从强制跑步转轮中取出。称量小鼠体重，然后将其放回其原居住笼中，在室温下恢复。在此期间，保持孵育室门打开，并将孵育箱设定温度调回室温，以使孵育室迅速降温，从而实现长期存活率超过99%。