小鼠横位主动脉弓缩窄术:一种诱导左心室高压的微创小鼠模型技术

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经皮主动脉缩窄或主动脉弓结扎是一种用于建立小鼠心血管疾病模型的简化手术方法。首先将小鼠麻醉后置于仰卧位,剃除颈部和胸部区域的毛发,沿正中线做切口以暴露皮下肌层。

切开肌层以暴露甲状腺和胸骨。接着,分离气管周围肌肉并剪断胸骨,以显露其下方的胸腺。将胸腺叶彼此分离,以暴露横位的主动脉弓和颈动脉。将一弯针置于主动脉弓下方,并从血管壁之间穿出。

将结扎线穿过此穿孔,并在环中放置一个垫片以调节环的直径。随后,收紧主动脉周围的缝线以阻断血管。这会增加右侧颈动脉的血流速度,导致升主动脉和左心室的血压升高。

随后,移除垫片并剪断缝线。然后,将器官复位并缝合皮肤。将小鼠转移至恢复笼中,并监测其心脏功能。主动脉缩窄可诱导左心室超负荷,导致心室壁增厚和心输出量下降。

开始操作前,使用持针器将两到四根30号针头的尖端弯曲,并将这些针头安装到单独的棉签上。接着,将一根27号针头的尖端磨钝,并用持针器将其尖端弯曲90度。然后,在硬质表面上将针尖磨平,制成一个0.4毫米的间隔器。通过脚趾夹捏无反应确认动物已达到适当的镇静水平后,将眼膏涂抹于动物的眼睛上,并将小鼠仰卧置于37摄氏度预热的加热垫上。

使用手术胶带将动物四肢固定在加热垫上。然后,用酒精和聚维酮碘溶液依次擦拭三次对皮肤进行消毒,并在动物体表覆盖无菌手术单,露出手术区域。开始结扎操作时,使用无菌手术刀在颈部与胸部中线位置切开皮肤。接着,在解剖显微镜下,用钝头剪刀轻轻分离结缔组织,将甲状腺向头部方向牵拉。

使用弯针将气管中线处的肌肉层向动物两侧分开,然后用钝头剪刀从胸骨约5毫米处剪至第二肋。用弯头镊子撑开切口,并用弯针分离胸腺叶和下胸部胸壁。此时,横位主动脉弓和两条颈动脉将清晰可见。

将弯针置于弓下方,并用针尖在血管壁与对侧结缔组织之间穿孔。用针将一根6-0单丝缝线穿过主动脉弓下方,并将预先准备好的垫片置入缝线环中。用双结固定缝线,然后轻柔地取出垫片。

确认结扎成功后,剪断缝线末端,使用6-0丝线以间断缝合方式缝合胸壁,随后用6-0单股缝线以连续缝合方式缝合皮肤。然后,在缝合部位涂抹聚维酮碘溶液,将动物置于预热的笼子中进行恢复及术后监测。