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生物学
0 次观看 • 2:52 分钟 • July 8th, 2025
小鼠胚胎被用作研究早期哺乳动物胚胎发育的模型系统。为了在所需的胚胎发育阶段获取围产期小鼠胚胎, 请从一只仰卧位的已处死的孕鼠开始。
接着,对小鼠腹部区域进行消毒,并在腹壁上做一横向切口,以暴露下方的子宫角。子宫角是长管状结构,内含一串胚胎。现在,通过切除周围组织,仔细将子宫角从腹腔中分离出来。
将收获的子宫角转移至含有缓冲液的培养皿中。冲洗子宫角以去除组织碎片和血液。随后沿子宫角上着床部位之间的区域进行切开,分离各个胚胎。切除蜕膜(母体胎盘层)以及胚胎来源的胎盘圆盘。
接下来,移除包绕胚胎的微小胚外膜结构,该结构为胚胎提供营养,即卵黄囊。最后,移除羊膜——最内层的胚外膜,由充满液体的囊状结构组成,包绕并保护胚胎——以释放小鼠胚胎。
回收的围产期胚胎可用于研究哺乳动物早期发育。
使用70%乙醇清洁解剖剪刀和镊子。为在E18.5或E19.5时期收集围产期胚胎,首先通过吸入二氧化碳处死怀孕小鼠,然后根据美国国立卫生研究院(NIH)指南进行颈椎脱位。
接下来,将70%乙醇喷洒在动物的腹侧腹部表面。然后,使用无菌解剖剪和镊子,最终打开腹腔。提起整个子宫,并在子宫角尖端处将其从体内分离。随后,用1x PBS在培养皿中冲洗整个子宫。
用解剖剪将子宫进行分段剪切,并用解剖镊去除胎盘蜕膜,以暴露卵黄囊中的胚胎。先去除卵黄囊,再用解剖镊去除羊膜,从而游离出围产期胚胎。