新生小鼠卵巢分离:从新生小鼠模型中获取一对卵巢的手术操作

0 次观看2:53 分钟 • July 8th, 2025

为了分离新生小鼠卵巢,首先将一只已处死的新生小鼠仰卧置于手术平台上。在皮肤和体壁上做一长切口,以暴露腹腔。接着,轻轻移开肠道,以显露下方的子宫角。

子宫角是两条长管状结构,向宫颈处汇合,从膀胱向肾脏方向延伸。在肾脏下方、子宫角末端处可识别出卵巢——即形状细小、呈卵圆形的腺体,通过输卵管与子宫角相连。

现在,从每侧子宫角上切下卵巢附着部位以分离卵巢。立即将切除的卵巢转移至含有适宜预温培养基的无菌培养皿中,以维持组织内卵母细胞的活性。将培养皿置于解剖显微镜的加热台上。

使用针头小心去除包裹卵巢的卵巢囊(一种结缔组织囊)以及任何残留的输卵管组织。最后,将卵巢转移至含有培养基的多孔板中。分离得到的卵巢可用于后续实验操作。

首先,将1毫升解剖液转移至每个无菌的玻璃胚胎培养皿中。处死出生后0至5天的幼鼠后,用精细镊子夹住覆盖腹壁的皮肤,切开皮肤和体壁。拉开此大切口,暴露腹部。此时膀胱通常充盈,可将其刺破以方便解剖操作。

使用钟表匠镊子将肠道移开。然后,在两侧从膀胱向上追踪子宫角至肾脏。卵巢是一种云状结构,位于肾脏下方、子宫顶端。轻轻夹住卵巢,并用剪刀将其从子宫上剪下。解剖出两侧卵巢后,将其转移至盛有温热解剖液的培养皿中。

使用带有37摄氏度加热载物台的解剖显微镜分离卵巢。利用胰岛素针头修剪去除卵巢囊和包括输卵管在内的任何多余组织,直至仅剩卵巢。然后,使用弯头移液管将每个卵巢转移至预先准备好的培养板的孔中。