小鼠胰岛移植模型:经门静脉输注胰岛的手术方法及术后出血的预防

0 次观看3:48 分钟 • July 8th, 2025

在胰岛素依赖型糖尿病的小鼠模型中,胰岛通过肝门静脉注射以达到治疗目的。胰岛细胞簇中的β细胞可产生胰岛素,这是一种调节血糖水平的激素。

门静脉注射是一种简单且有效的技术,但术后出血常导致模型动物死亡。为防止此并发症,将麻醉后的小鼠仰卧位固定。剃除腹部区域的毛发并涂抹消毒液。做切口以暴露腹腔。将肠管从腹腔中移出,置于湿润的纱布上,以暴露其下方的门静脉。

取一支预装有胰岛的胰岛素注射器。将针头斜面朝下,直接平行插入门静脉。回抽少量血液进入注射器以混匀胰岛,然后缓慢注射。反复推拉活塞多次,以注入全部胰岛悬液。随后,放置明胶海绵覆盖注射部位。

明胶是一种止血基质,可吸收血液并膨胀,在穿刺部位形成稳定的血凝块,从而止住出血。接下来,将肠管复位至腹腔内,并缝合切口。将小鼠放回其饲养笼中,并定期监测其恢复迹象。

确认角膜反射消失后,在眼睛上涂抹眼膏以防止干燥。剃除麻醉小鼠腹部的毛发,并用2%碘伏和75%酒精交替擦拭三次,对术区进行消毒。

接着,在腹部做一道1至1.5厘米的切口,打开腹膜腔。在切口周围放置一块无菌纱布,用镊子或棉签轻轻将肠管转移至纱布上。然后用浸有生理盐水的纱布覆盖肠管,暴露门静脉。

为防止胰岛移植引起的出血,使用明胶海绵时,应持针使针尖斜面朝下,并将针尖开口平行于门静脉壁放置。在将针插入门静脉前,回抽活塞,使20至50微升血液进入注射器,与胰岛混合,然后在反复按压和回抽活塞的同时,将胰岛注入门静脉。

当所有胰岛均注射完毕后,在注射部位覆盖一块约 0.5 × 0.5 厘米的明胶海绵。用棉签轻压明胶海绵,同时将针头从门静脉中退出。保持明胶海绵位置约两分钟,并轻轻滚动使其完全覆盖门静脉。

止血后,将肠管轻柔地复位至腹膜腔内原位,并向腹腔内注射500微升温热的生理盐水。使用缝线逐层缝合肌肉和皮肤。随后,将小鼠置于铺有加热垫的清洁笼中,持续监测直至完全从麻醉中恢复,每12小时给予一次镇痛处理,并持续保温48小时。