从小鼠模型中分离窦房结：一种从小鼠心脏获取窦房结的实验方法

在心脏中，窦房结（S-A 结）包含特化的肌细胞，这些细胞持续地在心脏内产生并传导电冲动，从而决定心率。

为了分离窦房结，首先将经抗凝处理的安乐死小鼠仰卧位固定。抗凝处理有助于防止血液凝固，从而实现高效的组织分离。

接着，做一个横向皮肤切口，然后切开肋骨的侧壁，以进入胸腔并暴露其下方的心脏。

用含有抗凝剂的缓冲液灌注心脏。连同气管一起取出肺脏。

切断主要血管，将心脏从胸腔中取出。将离体心脏转移至盛有缓冲液且衬有硅胶弹性材料的培养皿中，以处理这一精细器官。

固定心脏的心尖部。现在，定位下腔静脉和上腔静脉在右心房内的位置。进一步确定位于上下腔静脉之间组织区域内的窦房结位置。

剪除心尖以排出心脏内的血液。随后，将心房与心室分离。沿房间隔切开，去除左心房。将右心房展平，并从中切除窦房结组织。

首先用止血钳夹住已处死小鼠的皮肤，使用手术剪在肋骨下缘处从左侧肋弓到右侧肋弓之间横向剪开皮肤。然后用手术剪切开腹膜，小心地将肝脏与膈肌分离，注意不要划破肝脏，以防止大量出血。

沿胸廓切开膈肌，以暴露胸腔。使用手术剪从肋弓边缘向上沿肋骨侧壁剪至锁骨，以暴露心脏。然后，使用23号注射器针头将肋骨固定在肩部上方。

使用移液管将温热的含肝素完全提罗德溶液滴加在心脏上以保持其湿润。用超细格拉夫镊子夹住肺部，用手术剪剪断气管以去除肺部。在取出心脏时，用超细格拉夫镊子夹住心脏心尖，用手术剪剪断主动脉和下腔静脉。

将心脏转移至含有固化硅胶弹性体的培养皿中，并使用移液管向心脏灌注 2 至 3 毫升温热的含肝素完全台氏液。用解剖针将心脏的心尖固定于培养皿上。

用Dumont #2 脊椎钳夹住下腔静脉。将22号注射针头穿过下腔静脉和上腔静脉，以确定其在右心房中的位置，从而也可确定窦房结的大致位置。

用Dumont #2椎板切除镊夹住右心耳，并用解剖针穿过右心耳以固定其位置。对左心耳重复相同操作。然后，移除贯穿下腔静脉的注射器针头。

使用Castroviejo剪刀在心室处作横向切口，切除心脏心尖部分，或释放心脏中的血液。随后，加入温热的含肝素完全Tyrode溶液清洗心脏。使用Castroviejo剪刀沿房室间隔剪开，直至将心房与心室分离，并使切口靠近心室侧。

沿房间隔剪开以去除左心房。将解剖针插入右心房周边，使其平铺展开。使用Castroviejo剪刀清除心房上残留的脂肪、血管或组织，并在右心房内定位窦房结。