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生物学
0 次观看 • 4:02 分钟 • July 8th, 2025
将一只麻醉后的雌性小鼠置于手术平台,保持右侧卧位。随后,剃除小鼠腹部的毛发并消毒该区域。在腰部旁侧做一皮肤切口,分离腹肌以暴露腹腔。
现在,找到其中一个卵巢脂肪垫——即环绕卵巢的脂肪组织。 输卵管将卵巢连接到称为子宫角的长管状结构。接着,轻柔地将卵巢连同卵巢脂肪垫一起外置,并置于湿润的纱布上,以保持组织湿润。
现在,识别卵巢囊——即包裹卵巢及输卵管末端的薄层膜状结构。在卵巢门的对侧切开卵巢囊,卵巢门是卵巢与卵巢韧带之间的分界。卵巢韧带在结构上将卵巢与子宫角相连。
暴露卵巢后,轻轻将其从卵巢囊中取出,并在卵巢门处夹住以切除卵巢。将切除的卵巢转移至含有冷盐水的培养皿中。
将含有功能性单位——卵巢卵泡(每个卵泡内含一个卵母细胞)的完整小鼠卵巢保存起来,以备后续使用。
开始操作前,通过脚趾夹捏确认动物已达到适当的镇静程度,并在动物眼睛上涂抹眼膏。将小鼠仰卧置于一叠预热的纸巾上,从肋骨下方稍远处开始向远端移动,使用40号刀头的毛发剪刀,在动物身体中线两侧各去除一块2至3厘米见方的毛发区域,去除位置位于中线旁数毫米处,保留一条宽1至2厘米、覆盖中线的毛发条带。
给予镇痛处理后,将动物置于仰卧位的加热无菌手术区域上,先用一块2 cm × 2 cm、浸有70%乙醇的纱布擦拭,再用聚维酮碘溶液进行刷洗,以消毒手术区域。接着,在其中一个手术区域做一道1至1.5厘米长的腰旁切口,并使用剪刀钝性分离皮肤与其下方的筋膜组织。
然后,通过筋膜再做一个切口,并在筋膜下方尽可能表浅地向侧方钝性分离,直至进入腹腔。在切口上放置一块2厘米×2厘米的纱布手术巾,并用无菌生理盐水浸湿纱布。
使用小型镊子找到包围卵巢的脂肪组织,并轻轻将脂肪垫和卵巢移至手术巾上。卵巢脂肪垫的颜色比周围脂肪组织更白。在脂肪垫上放置一个1.5英寸的 Bulldog 夹,注意不要遮挡卵巢囊,以固定组织,便于操作过程中保持位置稳定。
使用解剖显微镜识别卵巢囊。然后用两把钟表镊夹住囊壁,并在远离卵巢门的一侧切开囊壁,以暴露卵巢。
在决定从何处切开浆膜囊之前,应先设想浆膜囊内一个用于放置新卵巢的囊袋位置,以便后续缝合。仅需将浆膜囊切开至足以取出内源性卵巢的范围即可。
轻柔地将卵巢从卵巢囊中取出,用钟表镊夹住卵巢门以切除卵巢并防止出血。然后,将供体卵巢置于含有4°C无菌生理盐水的培养皿中,并在皿上 loosely 盖上盖子。