小鼠颅骨环组件安装：在小鼠颅骨上植入可视化窗口组件以实现高分辨率颅骨骨髓成像的外科手术方法

在小鼠颅骨上植入颅骨环时，首先将麻醉后的小鼠俯卧位固定。接着，沿中线做垂直切口以暴露颅盖骨——即保护容纳大脑的颅腔的颅骨顶部结构。

现在，仔细剥离下方的骨膜——一层富含血管的致密结缔组织——并清除所有组织碎屑，以获得最佳成像效果。用生理盐水清洁暴露的颅骨表面。

接下来，将氰基丙烯酸酯胶水涂抹在金属颅骨环上，将其安装在干燥暴露的颅骨目标区域上方。

固定环的位置，使其牢固地附着在颅骨上。用生理盐水保持颅骨表面湿润。使用牙科水泥将环固定在颅骨区域，以防止后续成像过程中发生泄漏。

用生理盐水填充环形区域，作为高分辨率显微镜成像的浸没介质。

将带有颅骨环的小鼠转移至固定在块体夹持器上的支撑板上。抬高小鼠头部，以防止颅骨环从颅骨上脱落。

将环固定在固定块上，以固定小鼠头部，防止成像过程中因呼吸运动引起的运动伪影。调整支撑装置和小鼠组件的位置，以便通过颅骨进行活体成像，从而实现实时观察颅骨下方骨髓中特化细胞及其天然微环境。

用纸巾蘸取70%乙醇擦拭头皮以消毒，并清除松散的毛发。使用无菌精细剪刀和镊子，在头皮正中线两耳之间做一长度约1厘米的T形切口，以暴露颅骨。

用镊子暴露颅骨。然后使用剪刀和镊子小心去除骨膜。用浸有生理盐水的无菌棉签彻底清除所有骨膜、碎屑或毛发，以免影响成像效果。用生理盐水冲洗颅骨以去除任何血迹，并用棉签迅速擦干骨骼。

将胶水凝胶涂抹于环上。将环放置在暴露的骨面上，并保持数秒钟，以使环牢固地附着于颅骨。用浸有生理盐水的棉签轻轻润湿颅骨表面。

通过将蓝色和黄色组分以1比1的比例仔细混合，制备硅基牙科糊剂。在环形区域涂抹牙科糊剂以密封，防止成像过程中发生泄漏。小心清除可能进入环内的牙科糊剂或胶水。然后用生理盐水填充环形区域，检查是否存在泄漏。

将小鼠放置在支撑台上，在动物头部下方垫上折叠的敷料以抬高头部，并在将其连接到固定器时防止环状物从颅骨上脱落。将环状物旋紧在块状固定器上。将支撑台和小鼠组件放入加热的显微镜腔室中。