小鼠尾部淋巴水肿模型:一种在小鼠体内诱导持续性淋巴水肿的实验技术

0 次观看3:21 分钟 • July 8th, 2025

皮肤真皮层中存在淋巴管,其功能是清除组织中的过量组织液。淋巴管受损会导致组织间隙中液体积聚过多,并增加纤维组织和脂肪组织在皮下层的沉积。这些变化最终导致淋巴水肿。

为了在小鼠尾部诱导淋巴水肿,取一只麻醉后的小鼠,将其置于俯卧位。在距离尾根部适当远的位置进行全层环形皮肤切除。在尾部第一切口下方再做一个切口。

做一个垂直的皮肤切口,连接两个预先做好的切口。利用此切口,切除覆盖的皮肤区域,以暴露侧部静脉和淋巴管。

取一支含有示踪染料的注射器,在尾部末端附近皮下注射,使淋巴管呈现蓝色。横断淋巴管,包扎伤口部位,并在预定时间内监测小鼠。

显微解剖会阻断淋巴管中的淋巴流动,导致液体在组织间隙积聚。因此,在手术部位背侧的小鼠尾部可观察到持续性淋巴水肿,表现为肿胀。

首先,将8周龄的麻醉小鼠仰卧位固定,并用70%异丙醇对尾部进行消毒。使用卡尺从尾根部起每5毫米测量一次尾部直径。在距尾根部20毫米处,标记一个3毫米宽的环形切口。

在手术显微镜放大下,进行精细的3毫米全层皮肤切除,保留下方所有血管结构完整。先在上方做一环形切口,切至真皮层,随后在距第一切口远端3毫米处做一环形全层皮肤切口。再做一垂直的全层纵向切口以连接上述两个切口,然后用有齿精细镊夹住游离缘,使用显微剪刀在无血管平面内向深部解剖,分离至真皮层并位于静脉外膜浅层。

在尾尖近端皮下注射 0.1 毫升 1% 伊文思蓝。观察因注射而呈现蓝色的两条淋巴管,其位于尾侧静脉旁。使用直显微外科剪刀仔细切断淋巴管,在侧静脉与淋巴管之间分离出一个解剖平面。将一把剪刀的尖端插入淋巴管与侧静脉之间,然后闭合剪刀以切断淋巴管。操作完成后,用无菌透明粘性敷料覆盖尾部伤口。