建立尿路感染模型:一种向小鼠施用尿路致病菌以建立尿路感染模型的技术 关键词:尿路感染,尿路致病性大肠杆菌,动物模型,小鼠,膀胱感染,肾盂肾炎,UTI模型,细菌感染,泌尿系统,实验方法

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尿路感染(UTI)主要由尿路致病性E. coli细菌在肾脏、输尿管、膀胱或尿道中的定植引起。

为了建立尿路感染小鼠模型,首先将麻醉后的小鼠置于仰卧位。使用体视显微镜观察小鼠下腹部区域,以定位深粉色的尿道开口。

现在,取一支装有所需尿路致病菌溶液的注射器,其前端连接有套管针头。将导管垂直插入尿道,倾斜注射器使其呈水平位置,并继续推进,直至到达膀胱。

然后,缓慢将细菌接种物注入膀胱。保持注射器和导管在原位一定时间,以防止泄漏。缓慢地从尿道撤出导管,使细菌得以增殖。

进入后,细菌群体会侵入膀胱表层上皮细胞,并在这些细胞的细胞质中复制,形成胞内细菌群落(IBCs)。

最终,这些细菌释放到膀胱腔内,感染邻近的细胞,导致感染扩散。

尿路感染小鼠模型现已准备就绪,可进行后续深入分析。

将无菌的24号套管针针头安装在100微升注射器上。用制备好的细菌溶液填充注射器。将一只动物仰卧位放置在操作台面上,并通过鼻罩维持稳定的异氟烷麻醉。涂抹眼膏。通过轻柔按压并以环形动作按摩耻骨上区域,排出残留尿液。然后用70%乙醇清洁下腹部。

用生理盐水润滑导管尖端。将非优势手的食指放在腹部,轻轻向上推动。以90度垂直角度开始插入尿道。遇到阻力后,将导管转为水平方向再继续插入。缓慢注入50 µL的细菌接种物。注液后,将注射器和导管保持原位数秒,然后缓慢撤出,以防止泄漏。