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将所需胎龄的麻醉妊娠小鼠置于仰卧位。对腹部区域进行消毒。进行剖腹手术——穿过腹壁的手术切口。解剖腹肌,露出腹腔。
识别子宫角——容纳多个胎儿的长管状结构——使它们能够同时发育。轻轻地将子宫角从腹腔中取出,将它们横向放置。进一步,可视化候选小鼠胚胎的颈部。
轻
轻插入带有适当厚度缝合线的手术针,横向穿过子宫角区域,远离胎盘。将针头进一步推进到气管所在的颈部前部。将针头从子宫角对面的颈部排出。小心地拧紧缝线以闭塞气管,确保子宫壁的完整性。将子宫角放回腹腔。
将
温盐水注射到腹膜腔内,以促进妊娠进展。关闭手术切口并让小鼠恢复。建立的小鼠胎儿气管闭塞模型可用于研究闭塞气管对肺发育的影响。
用酒精和聚维酮碘清洁腹部表面,并在整个手术过程中保持无菌状态。对怀孕母亲进行剖腹手术进行垂直切口,并分别切割所有层。识别两侧的子宫角并确定手术的候选胎儿。
如果每侧有偶数个胎儿,则对每个子宫角中的两个胎儿进行手术,如果每个子宫角有奇数,则对每个子宫角中的一个胎儿进行手术。使用 2 倍放大镜进行可视化,以横向方式定位子宫角。以眼睛和尾巴为指导,将幼崽朝上放在两根手指之间。
对幼犬的头部施加轻轻的压力,以允许头部伸展,并观察颈部。使用无创伤针和 6-0 聚丙烯缝合线进行气管闭塞或 TO。将胎盘放在一侧,远离针头的入口和出口点。
将
针头横向插入子宫侧面,远离胎盘,穿过颈部三分之一的前部。然后,将针头轻轻移至颈部中线。将其引导至前部,然后从气管之间的颈部离开颈部,与颈动脉鞘和子宫相对。
打结缝合
线,注意保持膜和子宫壁的完整性。更换腹部的子宫角,并在闭合前向腹膜腔注射 2 毫升温热的无菌生理盐水。
放置运行的 5-0 polyglactin 缝合线以闭合腹壁,并用非运行丝缝线闭合皮肤。腹腔内施用0.1mg / kg丁丙诺啡镇痛,并让母牛在温暖的培养箱中恢复。观察手术动物可以自己进食并将其单独关在单独的笼子里。