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生物学
0 次观看 • 3:56 分钟 • July 8th, 2025
将一只处于所需妊娠阶段的麻醉后怀孕小鼠置于仰卧位。对腹部区域进行消毒。进行剖腹手术——即通过腹壁做外科切口。分离腹肌以暴露腹腔。
识别子宫角——容纳多个胚胎的长管状结构,使其能够同时发育。轻柔地将子宫角从腹腔内牵出,使其呈横向放置。进一步观察目标小鼠胚胎的颈部。
使用适当粗细的缝合线,将外科缝合针轻轻横向穿过远离胎盘的子宫角区域。将针继续向前推进至颈部前部气管所在位置。引导缝合针从与子宫角相对的一侧颈部穿出。仔细收紧缝线以闭合气管,同时确保子宫壁的完整性。将子宫角复位回腹腔内。
向腹腔内注射温盐水以促进妊娠进展。缝合手术切口,并让小鼠恢复。已建立的小鼠胎儿气管阻塞模型可用于研究气管阻塞对肺发育的影响。
用酒精和聚维酮碘清洁腹部表面,并在整个手术过程中保持无菌条件。对妊娠母鼠进行剖腹手术时做垂直切口,逐层切开各层组织。辨认两侧子宫角,并确定拟进行手术的候选胎鼠。
如果每侧子宫角的胎兽数量为偶数,则在每个子宫角操作两个胎儿;如果为奇数,则在每个子宫角操作一个胎儿。使用2倍放大眼镜进行观察,将子宫角横向放置。以眼睛和尾巴为标志,用两根手指将胎鼠向上固定在手指之间。
轻轻按压幼鼠头部,使其头部伸展,以便观察颈部。使用无创针和6-0聚丙烯缝合线进行气管阻断(tracheal occlusion,TO)。操作时保持胎盘位于一侧,并远离针的进针点和出针点。
将针头横向穿过子宫侧壁,避开胎盘,经颈部前三分之一处进入。然后,轻柔地将针头移至颈部中线。将其导向前方,随后在气管与对侧颈动脉鞘及子宫之间穿出颈部。
打结缝合线,注意保持胎膜和子宫壁的完整性。将子宫角放回腹腔,并在关闭切口前向腹膜腔内注射2毫升温热的无菌生理盐水。
使用5-0聚乙醇酸缝线连续缝合腹壁,并用非连续丝线缝合皮肤。按0.1 mg/kg剂量腹腔注射布托啡诺以镇痛,将母鼠置于温暖的孵育箱中恢复。观察手术动物能否自主进食,并将其单独饲养于各自的笼中。