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在病理条件下,结肠镜检查可实现对结肠的可视化,并通过钳取活检获取组织,以对炎性创面进行详细分析。
在小鼠中进行结肠镜引导下的钳取活检时,首先准备活检组件。该组件包含一个连接单元,以及带有预先插入的合适直径结肠镜的内镜鞘管。结肠镜连接至光源、视频源、气体通道,以及用于活检钳的器械通道。
接下来,将一只麻醉后的小鼠俯卧位放置在结肠镜检查平台上。将尾巴向上拉起,使用灌胃针向肛门内注入适量缓冲液,以冲洗任何粪便物质。然后将结肠镜插入肛门并推进至直肠。在推进结肠镜向结肠方向移动的同时,持续注入气体以保持结肠处于充盈状态。
接下来,将镊子从器械通道中移出并张开钳口。将镊子旋转至直角,以形成深度适宜的伤口。伤口过浅或过深将分别导致表浅性损伤或结肠穿孔。随后,使用活检钳夹取结肠组织。所获取的组织样本及所形成的伤口可进一步用于分析,以理解其病理生理机制。
开始操作前,将一根1.9毫米刚性内径内窥镜插入内窥镜套管中,并根据制造商的说明将组装好的内窥镜连接至光源和视频成像设备。使用提供的管路将空气泵连接至套管左侧的气体阀门,该阀门位于工作通道旁。
确保工作通道处于打开位置,将3 Fr活检钳经工作通道插入。将活检钳向前推进至鞘管末端,但不得伸出鞘管外。
接下来,将麻醉后的小鼠腹侧朝下放置在内镜分期平台上,并通过检查其对足底反射无反应来确认适当的镇静程度。涂抹眼膏后,用室温磷酸盐缓冲液(PBS)填充一支带有大鼠灌胃针头的3毫升注射器,将针头插入小鼠肛门约1厘米深处。缓慢注入PBS,直至清除粪便物质。随着注入的PBS,应有数个粪便颗粒从小鼠体内排出。
将组装好的内窥镜插入肛门内0.5厘米处,并将活检钳推进至直肠已清理的管腔内,直至活检钳的整个“钳口”超出鞘管末端。将活检钳旋转90度,使钳口呈东西方向打开,张开钳头并向前推进约1厘米,然后以平稳快速的动作闭合并回撤活检钳,以获取活检组织。为避免在进行活检时完全充气扩张结肠,请保持气体阀门右侧处于开放状态。