结肠镜引导的小鼠伤口模型:一种通过分离结肠活检诱导的伤口床以研究愈合过程的方法

0 次观看2:48 分钟 • July 8th, 2025

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在小鼠模型中,结肠镜引导下的活检会在结肠内诱导产生伤口位点。这些伤口床被分离出来用于分子和组织学研究,以了解胃肠道(即GI道)炎症性疾病中伤口愈合的过程。

开始创面床分离时,将因结肠镜诱导产生创面而被实施安乐死的实验小鼠置于仰卧位。切开腹部皮肤及下方肌肉,暴露体腔。

将闭合的剪刀置于结肠下方并抬起结肠。在结肠中点及肛门处剪断,以将其从体内分离。用适当的缓冲液冲洗结肠,以去除粪便内容物。

将结肠放置在滤纸上,并沿纵轴切开,使肠系膜面朝下贴附于滤纸上。随后,在结肠表面滴加亚甲蓝染料,并在显微镜下观察。

染料可使伤口床中的坏死和颗粒组织着色,使其颜色比周围健康组织更深,从而便于识别。保留分离的伤口床用于基因表达研究。

在适当的实验终点,切开皮肤和腹肌层以暴露实验动物的体腔,并将闭合的镊子置于结肠下方。轻轻提起结肠,使其与下方的肠系膜分离,然后在结肠中点及肛门处剪断组织,以从小鼠体内取出结肠。

使用一个装有冰冻 PBS 的 20 毫升注射器,并连接大鼠灌胃针,冲洗出粪便内容物;将清理后的结肠置于一张滤纸上。沿纵轴切开结肠,注意将肠系膜侧朝下紧贴滤纸,然后用巴斯德吸管将 0.2% 亚甲蓝溶液覆盖于黏膜表面。

数秒后,倒掉多余的染料,将结肠置于解剖显微镜下观察以定位伤口床。使用4英寸微型虹膜剪刀沿伤口床边缘剪取组织,注意避免剪入肌肉层,并用尖头镊子将分离的组织转移至离心管中,用于速冻和/或储存。

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最后更新:15 八月 2026