小鼠近端结肠袢模型的建立：一种通过肠腔内注射荧光标记物并检测血清中荧光信号以评估肠道通透性的外科手术方法

在病理状态下，肠上皮紧密连接屏障功能受损，导致有害的管腔内容物更易渗透进入体循环，从而引起全身性炎症反应增强。

为了通过建立小肠近端结肠环或 pcLoop 模型来评估肠道通透性，将一只麻醉小鼠以仰卧位固定。沿腹中线做切口。轻柔地将盲肠、回肠末端和近端结肠拉出体外，并置于湿润的纱布上以保持器官湿润。

找到近端结肠的肠系膜——含有血管的腹膜膜性皱襞。在盲肠远端的肠系膜上，选择两个无血管且间距适当的位点进行结扎，并穿孔。

在选定位置结扎后，在结扎部位附近做切口，以分离出一段不受血供影响的pcLoop节段。用缓冲液冲洗该节段，以去除任何粪便物质。

手术结扎灌流肠段的切断端。将所需的荧光标记物溶液注入结肠段肠腔内。将器官复位至腹腔。缝合手术切口，并让小鼠恢复。

注射后，肠道屏障完整性降低，促使荧光标记分子从肠腔通过细胞旁途径更易转运至血液循环中，可在血液的血清组分中检测到这些分子，从而评估肠道通透性。

将小鼠准备就绪以进行手术，并暴露盲肠。使用湿润的棉签将整个回肠移出体外，并置于湿润的棉纱布上方。在肠系膜中识别近端结肠的血液供应。游离近端结肠，并在肠系膜无血管区域、距盲肠约0.5厘米远端处，打第一个结扎线。

从第一条结扎线处量取2厘米，在结肠系膜无血管供应区域创建第二条结扎线。使用精细剪刀，紧贴每条结扎线旁小心剪切，以分离出一段长2厘米的pcLoop。

使用连接在10毫升注射器上的柔性黄色喂养管，以温热的HBSS轻柔冲洗pcLoop，以清除粪便。确保将管腔内容物冲洗出腹腔，以保持手术部位清洁。随后，使用丝线结扎已冲洗的pcLoop的两个断端。

使用带有30号针头的1毫升注射器，缓慢向肠腔内注射200微升试剂（如FITC-葡聚糖或趋化因子）。pcLoop将随之膨胀，导致黏膜适度扩张。用湿润的棉签轻轻将结扎的pcLoop、回肠和盲肠复位。使用持针器、解剖镊和带反向切割针的3.0号不可吸收丝线缝合腹壁。