分离IPE和RPE细胞：一种从离体猪眼中获取色素上皮细胞的技术

猪眼含有一定数量的立方上皮细胞，这些细胞内存在大量黑色素体——一种有助于吸收光线的细胞器——从而使这些细胞呈现色素性外观。根据这些细胞所处位置的不同，位于视网膜下方的上皮细胞称为视网膜色素上皮细胞（retinal pigment epithelial cells，RPE细胞），而分布于虹膜内层的则称为虹膜色素上皮细胞（iris pigment epithelial cells，IPE细胞）。

为了分离视网膜色素上皮（RPE）和虹膜色素上皮（IPE）细胞，首先取一个猪眼。将眼睛浸入适当的消毒溶液中，以去除附着在眼球表面的任何微生物。

将眼球从消毒液中取出，用针头在虹膜附近做一个小切口。利用此切口沿虹膜边界进行完整的环形切割。此操作可将含有虹膜的眼前段与带有视网膜的后部眼球分离。去除多余组织，将虹膜和眼球分别转移至不同的培养皿中。

向含有虹膜和眼球的培养皿中加入适量的培养基。刮取组织，通过机械力使上皮细胞松脱并释放到培养基中。吸取分离的虹膜色素上皮（IPE）和视网膜色素上皮（RPE）细胞，分别接种至不同的培养皿中，孵育备用。

清除眼球上残留的肌肉组织和皮肤，用含碘溶液对眼球进行消毒，再用PBS冲洗。

为分离IPE细胞，按所示方法去除晶状体并取出虹膜。制备两份虹膜后，加入1毫升完全培养基，用经火焰抛光的扁平巴斯德吸管刮取细胞以完成分离，随后对细胞进行计数并接种。将培养板放入培养箱中。

为了分离视网膜色素上皮（RPE）细胞，需从眼球后段去除玻璃体和视网膜，并将眼球置于培养皿中。向眼球内加入1毫升完全培养基。使用经火焰抛光的弯头巴斯德吸管刮取RPE细胞，用1,000微升移液器收集眼球内的细胞悬液，并转移至1.5毫升离心管中以重新悬浮。随后对细胞进行计数、接种，并按照先前所示方法培养细胞板。