角巩膜纽扣状组织分离:一种从猪眼获取角巩膜纽扣状组织的手术操作方法

0 次观看3:17 分钟 • July 8th, 2025

眼睛的前部由角膜覆盖——角膜是一种透明层,允许光线通过。角膜延伸至巩膜——巩膜是眼睛周围白色的保护组织。眼睛中由巩膜薄环围绕角膜所组成的部分称为角巩膜瓣。

为切除角巩膜纽,将完整的猪眼置于培养皿上。去除巩膜周围的眼结膜(巩膜外层的黏液性覆盖物)以及周围的眶外肌,以暴露巩膜表面。使用适当的消毒液处理眼球,以清除眼球表面可能存在的污染微生物。 

用缓冲液冲洗掉消毒剂。将消毒后的 eyeball 转移至新的培养皿中。在靠近角膜边缘的巩膜处做一切口。通过此切口进行完整的环形切割,将 eyeball 分为两部分。

观察前部切面的内侧,以定位附着于巩膜的葡萄膜。该组织由含色素的虹膜、环状的睫状体以及部分血管丰富的脉络膜层组成。  分离葡萄膜以观察角巩膜层。将组织块置于无菌缓冲液中保存,用于后续检测。 

使用无菌镊子将眼球转移至培养皿中。用15号手术刀片和镊子去除眼球周围的结膜和肌肉组织。然后用镊子夹住视神经,轻轻提起眼球,并将其转移至装有无菌PBS的半升玻璃瓶中。

在清除所有眼球周围的组织后,使用无菌镊子将其转移至另一个装有 PBS 中 3% 聚维酮碘溶液的半升容器中。眼球在该容器中放置一分钟后,将其转移至第三个装有无菌 PBS 的容器中。

将眼球置于洁净的培养皿中,用镊子固定。使用#10A手术刀片在角膜附近做切口。用剪刀切除角膜,周围保留约3毫米的巩膜。确保剪刀尖端位于脉络膜上腔,避免刺穿虹膜。

用镊子夹住角巩膜瓣,再用另一把尖头镊子轻轻分离葡萄膜组织。然后,提起角巩膜瓣,使其与眼球其余部分分离。将瓣短暂浸入含1.5%聚维酮碘的PBS溶液中冲洗。随后,将瓣置于12孔板中的无菌PBS中。