0 次观看 • 3:29 分钟 • July 8th, 2025
在培养皿中制备一层氟化乙烯丙烯（FEP）粉末。将含有卵丘-卵母细胞复合体（COCs）的成熟培养基液滴滴加到FEP粉末上。轻轻滚动液滴，使其在粉末表面形成液态弹珠（LM）。FEP粉末形成一层疏水性多孔外壳，允许内部液体与周围环境之间进行气体交换。
现在，收集LM单元并将其转移至IVF培养皿的中央孔中。在外圈加入无菌水以保持卵丘-卵母细胞复合体（COCs）的水合状态。随后，在生理条件下孵育LM，以促进卵母细胞成熟。
接下来，移除用过的培养基，并加入新鲜的成熟培养基。直接的液体接触会破坏疏水性氟化乙烯丙烯共聚物（FEP）外壳，使液态微滴破裂，从而释放出冠卵复合体（COCs）。将释放出的冠卵复合体转移至含有新鲜成熟培养基液滴的新培养皿中，并进行洗涤以去除FEP颗粒。
洗涤后，将卵丘-卵母细胞复合体（COCs）和新鲜培养基转移至FEP粉末床中。滚动液滴以使其表面均匀包裹粉末。最后，将LM转移至体外受精培养皿中。经FEP粉末包被的LM可维持卵母细胞的三维结构，并提高其存活率。
在30毫米的培养皿中铺一层5克FEP粉末。将一滴含有3至5个卵丘-卵母细胞复合体（COCs）的成熟培养基滴加到FEP粉末上。轻轻以圆形轨迹旋转培养皿，确保粉末颗粒完全包裹液滴表面，形成液态弹珠（liquid marbles，LMs）。
准备多个60毫米的IVF培养皿，在外圈加入3至4毫升无菌水以形成湿度环境。用1,000微升移液器吸取形成的LM，并将其放入中央孔中。将“marbles”在38摄氏度、5%二氧化碳培养箱中孵育四天。
更换培养基时，将30微升成熟培养基加入每个LM中，使其铺展开来。当“marble”内容物溶解后，将从生物反应器中释放出的COCs转移至培养皿中的新鲜成熟培养基液滴中。在成熟培养基中洗涤3至4次后，将COCs连同30微升新鲜培养基一起转移至FEP粉末床中。
轻轻旋转培养皿，使其做圆周运动，确保粉末颗粒完全覆盖液滴表面并形成一个新的液态膜（LM）。然后，将该液态膜转移至体外受精（IVF）培养皿中。