水动力基因递送：一种技术方法 体内 通过尾静脉注射将外源DNA转染入小鼠肝细胞

进行水动力基因转导时，首先取一支装有含重组质粒的盐溶液的注射器，其中质粒携带目的基因。随后，取小鼠模型，于尾部基部快速注射大量质粒溶液，确保质粒溶液经尾静脉注入体内。

通过高压注射大量质粒可产生一种称为流体动力学力的机械力，该力会增加下腔静脉内的血管压力——下腔静脉是将缺氧血液输送至心脏的静脉。

大量液体体积导致心脏右心室充血，迫使血流方向逆转。此步骤促使质粒溶液进入肝静脉，并被输送至肝脏。

质粒在肝窦内移动——肝窦是肝脏中由内皮细胞衬覆的腔隙。血容量增加有助于质粒穿透内皮层，使其更接近周围的肝细胞——即肝实质细胞。 

质粒溶液的快速流入会对肝细胞膜产生压力，从而形成瞬时孔隙。这些孔隙有助于细胞摄取质粒DNA。随后，细胞膜上的孔隙闭合，将质粒封闭在肝细胞内。

目的基因在肝细胞中的成功表达证实了转染的实现。

首先称量小鼠体重，然后配制无菌生理盐水溶液，其中含有每毫升15微克无内毒素的sleeping beauty载体构建体和每毫升1微克无内毒素的pc-HSB5。配制足够量的溶液，使每只小鼠注射体积为其体重的10%。用无菌3毫升注射器抽取一只小鼠所需的药液体积，并安装27号针头。

加入适量的纸巾，以尽量减少活动空间，同时保留足够的呼吸空间后，将小鼠放入带有通气孔的适当固定器中。使用红外灯加热尾部 30 至 60 秒，期间需密切观察过热迹象，例如尾部快速摆动或其他躁动表现，随后用酒精棉片清洁尾部。

将针头几乎水平地插入尾部基部附近的两条侧尾静脉之一。若插入成功，可能会有少量血液回流至针头前端。在8到10秒内将全部体积注入尾静脉。注射后，立即从固定器中取出小鼠。用无菌纱布按压注射部位至少30秒，或直至出血停止。

成功的水动力尾静脉注射对于转染至关重要，尤其依赖于注射速度、体积和时间。为了使静脉注射更顺利，需确保小鼠在注射当天未处于应激或脱水状态。

在恢复笼中单独饲养30至60分钟后，将小鼠转移回其原始笼子中。