木质素的莫尔染色法:一种表征木质素分布的技术 拟南芥 茎段

0 次观看2:44 分钟 • July 8th, 2025

木质素是植物细胞壁中的重要结构组分。它是一种聚合物,主要由丁香基醇(即S-木质素单元)和愈创木基醇(即G-木质素单元)构成,还含有少量对香豆醇,称为H-木质素单元。

S-木质素的含量在不同植物次生组织中有所差异,主要存在于木质部导管、纤维以及束间纤维中,为其提供结构支持。

为了检测 S-木质素的存在,取琼脂糖包埋的双子叶植物茎横切片放入试管中。将茎切片依次用高锰酸钾染色液处理,随后用稀盐酸处理,最后用氨水——一种弱碱——处理。

在此处理过程中,细胞壁中存在的S-木质素部分经历一系列变化,最终生成一种呈红色的产物。

由于木质部细胞中S-木质素含量较束间纤维少,因此其红色着色强度较低,而束间纤维呈现更深的红色。将切片转移至载玻片上,并在光学显微镜下观察。

红色强度的变化有助于理解木质化植物组织中S-木质素的相对比例。

进行玫红酸染色时,将茎段转移至微量离心管中。向含有茎段的管中加入1毫升0.5%高锰酸钾溶液。用移液器轻轻吹打0.5%高锰酸钾溶液,最好在不扰动茎段的情况下进行上下混匀。

孵育2分钟后,重复吹打,然后静置微量离心管,直至所有组织片完全沉降。用1毫升移液器吸取700微升0.5%高锰酸钾溶液。加入700微升蒸馏水以冲洗高锰酸钾,重复3至4次,或直至水溶液保持澄清为止。

弃去水后,迅速加入1毫升3%盐酸,直至切片中的深棕色褪去。该过程可能在3至5分钟内完成,也可能需要每次5分钟的两次洗涤。用移液器吸出所有3%盐酸溶液,并立即加入1毫升浓氨水溶液,然后在明场照明下进行成像。