Calcofluor White 染色:一种对双子叶植物茎切片细胞壁中纤维素沉积物进行紫外线诱导荧光可视化的简单方法

0 次观看2:37 分钟 • July 8th, 2025

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在植物细胞中,细胞壁(一种特殊的保护层)围绕着质膜。细胞壁主要由纤维素组成,纤维素是葡萄糖单体的线性、无支链多糖,通过β-1、4糖苷键对端连接。

纤维素以正交排列的纤维素微纤维的形式以聚集状态存在,嵌入半纤维素、果胶和蛋白质基质中。

某些细胞,例如维管束木质部组织和束间纤维的细胞,其细胞壁中还含有木质素(一种硬化剂)。

要可视化植物细胞壁中的纤维素沉积,首先是缓冲液中双子叶植物茎的琼脂糖包埋横切面。加入钙荧光白水溶液,一种化学荧光平面染料。孵育以使染料扩散到组织中。

一旦进入内部,钙荧光白通过其羟基官能团相互作用并与纤维素中葡萄糖单体的羟基形成氢键。这使得染料与纤维素非常接近,并有利于额外的范德华相互作用,从而产生稳定的染料-纤维素络合物。

阀杆部分转移到载玻片上并安装盖玻片。在紫外线照射下,纤维素结合的染料分子发出亮白色荧光。

由于

纤维素含量高,表皮、皮层和髓的细胞表现出强烈的荧光,细胞壁轮廓清晰。相比之下,木质部和束间纤维的细胞发出微弱的荧光,可能表明由于木质素的存在,染料扩散不足。

对于 calcofluor 白色染色,将茎部分转移到微量离心管中,并加入一毫升 0.02% calcofluor 白色溶液。轻轻地上下移液溶液。继续孵育,并按照文本方案中的详细说明清洗切片,然后在紫外线下观察切片。

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最后更新:1 八月 2026