基于脑电图的癫痫样活动记录技术

神经元释放的化学神经递质会影响邻近细胞，使电冲动在神经元之间传递。兴奋性神经递质过多会导致大脑电活动紊乱，引发反复发作的癫痫发作——即神经元异常重复放电以及神经元逐渐死亡，最终导致癫痫。

为了在离体条件下记录癫痫样活动，首先取含有大鼠幼崽脑源性鼻周皮层-海马体脑片的膜插件，这些脑片可呈现逐渐发展的癫痫样事件。每个脑片具有明确的齿状回（DG）区域和海马角（CA）区域，后者由紧密排列的多极锥体神经元组成。

将脑片进行长时间培养，模拟逐渐血清剥夺所诱导的应激条件，从而导致神经元死亡，类似于 体内 癫痫状态。将一个器官型脑片置于电生理——脑电图（EEG）记录装置的记录室中，使海马接触记录室底部。

记录室预先装有含 L-谷氨酰胺（一种神经递质前体）的培养基，可启动神经元兴奋。将连接有人工脑脊液的玻璃毛细管的接收电极插入富含锥体神经元的 CA3 区域。

记录电活动。生成电图，简要显示发作事件——即出现突然峰形的区域——对应于癫痫样活动的起始。

发作事件数量增加且持续时间延长，提示为复发性癫痫发作。

在闭合回路中准备电生理实验装置。确认界面式记录室的流速设定为每分钟2毫升，并打开碳酸盐阀门。检查系统中的水位，并在界面记录室中放入一片滤纸以吸除多余的培养基。

在切片下方放置一张镜头清洁纸以提供介质，并打开温度控制器、放大器和显微操作仪。

使用注射器将新配制的人工脑脊液装入玻璃电极中。将玻璃电极插入接收电极内，并等待界面室中的温度稳定在37摄氏度。

在生物安全柜中操作，将插入物置于含一滴培养基的60毫米培养皿中。使用锋利的刀片从插入物上切下一小片，将其放置于界面切片槽中，使海马体朝向右下角。然后，将接收电极插入CA3锥体细胞层中。

启动连续采集程序，并记录切片30分钟。