通过免疫磁珠阴性选择法从全血中分离单核细胞

通过免疫磁珠阴性筛选法从全血中分离单核细胞（一种白细胞）时，先在试管中获取经抗凝剂处理的人血。加入含有 Fc 受体阻断抗体和双特异性四聚体抗体复合物的抗体混合溶液。

每种抗体复合物包含两种单克隆抗体，其中一种抗体特异性结合非单核细胞（包括白细胞和红细胞）的细胞表面抗原，另一种抗体特异性结合葡聚糖。

加入葡聚糖包被的磁珠溶液。孵育。Fc受体阻断抗体与单核细胞的Fc受体结合，防止单克隆抗体的非特异性结合。

抗体复合物中的单克隆抗体可识别并结合非单核细胞表面的特异性抗原，从而使单核细胞保持未标记状态。葡聚糖包被的磁珠则通过结合抗体复合物中的抗葡聚糖抗体，将非单核细胞与磁珠交联在一起。

将离心管置于磁力架中。在高梯度磁场的作用下，磁珠交联的细胞会结合在离心管管壁上，而单核细胞则保留在离心管中央。

用移液器吸取含有单核细胞的溶液，转移至新的离心管中。加入磁珠，交联去除不需要的其余细胞。置于磁场作用下，富集单核细胞群体。

将单核细胞悬液转移至新的离心管中。离心该悬液。用缓冲液重悬单核细胞，用于后续分析。

在四个10毫升的EDTA真空管中采集40毫升新鲜人全血后，使用无菌技术在生物安全柜中将所有血液转移至一个50毫升的圆锥形聚丙烯管中。根据所选的人单核细胞分离试剂盒的说明书，向血液管中加入2毫升试剂盒中的单核细胞分离混合液，并将试剂盒中的磁珠涡旋振荡30秒。

向血液中加入 2 毫米的磁珠，并使用 25 毫升血清学移液管小心地将磁珠与血液混合。室温孵育 5 分钟后，将血液均分为四份，分别加入四个 50 毫升离心管中，每管加入 30 毫升含 1 毫摩尔 EDTA 的无菌 PBS。再次使用塑料 25 毫升血清学移液管混匀，并将离心管置于磁力架上。

10分钟后，用移液器从每根试管的中心吸取液体，注意吸取的红细胞体积不得超过1毫升，并将管内液体转移至四根新的50毫升离心管中。向每根离心管中额外加入500微升经涡旋混匀的磁珠，轻轻混匀细胞悬液。将离心管重新放入磁力架中静置5分钟，然后小心地将每根管中中心部位的液体转移至四根新的50毫米离心管中。

当所有细胞悬液均转移完毕后，将每个新的50毫升离心管放入磁力架中静置5分钟，然后小心地将管内液体转移至另一组四个新的50毫升离心管中。接着，通过离心收集细胞，并将全部四个细胞沉淀重悬于总共10毫升的无菌PBS中，用于细胞计数。