体外小鼠骨髓基质细胞向脂肪细胞的分化

脂肪细胞，即储存脂肪的细胞，是脂肪组织中的主要细胞，可分泌脂肪因子——这类免疫信号分子能够调节免疫反应。

生成脂肪细胞 体外从一个含有贴壁培养的小鼠骨髓基质细胞（BMSCs）的多孔板开始——BMSCs 是未分化的多能细胞。

使用含有磷酸二酯酶抑制剂和地塞米松（一种合成的糖皮质激素）的脂肪细胞诱导培养基处理细胞，以诱导其分化。 

抑制剂进入细胞后，使环核苷酸磷酸二酯酶失活，这类酶对于降解环磷酸腺苷（cAMP）至关重要。这种抑制作用导致细胞内cAMP水平升高，而cAMP水平升高对细胞分化具有关键作用。

地塞米松与BMSCs中的细胞内受体结合后进入细胞核，激活参与脂质合成与积累的基因。这一过程诱导BMSCs分化为前脂肪细胞——即成熟脂肪细胞的前体细胞。

用新鲜的诱导培养基替换耗尽的培养基以维持前脂肪细胞。经过特定时间后，用含有高浓度葡萄糖和胰岛素的脂肪细胞基础培养基处理细胞。

胰岛素与其特异性的细胞表面受体结合，激活细胞表面葡萄糖转运蛋白的转位，促进葡萄糖进入前脂肪细胞。细胞利用多余的葡萄糖合成脂滴，导致脂质蓄积过程——即脂肪生成，从而促进前脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化。

使用脂质染色染料处理细胞，并在光学显微镜下观察。成熟的脂肪细胞呈圆形，含有多个红色脂滴。

为诱导骨髓干细胞向脂肪细胞分化，将汇合的骨髓细胞培养物中的细胞培养基更换为脂肪细胞诱导培养基。培养两天后，将上清液更换为新鲜的脂肪细胞诱导培养基，并在第4天转换为脂肪细胞维持培养基。在第7天，确认细胞已积累脂滴，且表型特征与成熟脂肪细胞相似。