从人外周血单个核细胞中培养活化T细胞

初始T细胞与抗原呈递细胞（APCs）之间多种细胞表面受体-配体相互作用可引发T细胞的活化与增殖。

该过程中的两个主要事件包括：CD3-T细胞受体复合物识别抗原提呈细胞（APC）表达的抗原，随后APC表达的B7配体与T细胞受体CD28发生相互作用。

研究T细胞的活化与增殖 体外取悬浮于适当培养基中的人外周血单个核细胞（PBMCs），加入包被有抗CD3和抗CD28抗体的磁珠，将细胞分装至两个锥形管中。

向第一管中加入细胞因子白细胞介素-2（IL-2），向另一管中加入白细胞介素-15（IL-15）。将细胞转移至多孔板中。孵育。

磁珠上的抗CD3和抗CD28抗体分别结合T细胞表面表达的CD3-T细胞受体复合物和CD28受体，从而引起T细胞的活化与增殖。

在IL-2作用下，该细胞因子与活化T细胞表面的受体结合，促使其分化并增殖为效应T细胞。相反，IL-15主要促进T细胞分化并增殖为记忆T细胞。

重悬细胞，并将一半细胞转移至新的孔中以促进细胞生长。加入含有IL-2或IL-15的新鲜培养基，以维持细胞因子分化的T细胞群体，用于后续分析。

首先，通过将每百万个细胞12.5微升的CD3/CD28磁珠转移至微量离心管中，并在管中每12.5微升磁珠加入12.5微升PBS，对磁珠进行洗涤。然后，将微量离心管置于合适的磁力架上1分钟，弃去上清液，并将磁珠重悬于原始体积的T细胞培养基中。

接下来，按每百万个细胞12.5微升磁珠的用量加入磁珠，磁珠与细胞的比例为1:2，并将细胞分为两种处理条件，每种条件约含500万个细胞。然后，向每种条件中加入相应体积的细胞因子，并将细胞转移至多孔板中。在37摄氏度、5%二氧化碳条件下培养细胞3天。

孵育三天后，配制含有双倍浓度细胞因子的新鲜T细胞培养基。将细胞重悬并分瓶，从每个孔中转移一半体积至新孔中，然后向每个孔中加入等体积的新配制T细胞培养基。