从小鼠肝脏中分离边缘池白细胞

边缘化的肝内白细胞（MH白细胞）附着在由内皮细胞衬覆的特化肝脏血管或肝窦壁上。在炎症刺激下，MH白细胞会被募集至周围组织中。

为获取MH白细胞，先将小鼠安乐死后置于仰卧位。切开腹腔和胸腔，暴露肝脏和心肺复合体。

移位肠道以暴露门静脉，门静脉负责将来自脾脏、胃肠道及其相关器官的血液输送至肝脏。将连接至蠕动泵的针头插入门静脉。

在灌注过程中，解剖下腔静脉——这是一条将来自肝脏的去氧血液输送至心脏的主要血管——以收集灌注液。

通过门静脉以低流速、短时间灌注含有抗凝剂的缓冲液。此步骤有助于通过下腔静脉流出液将血液及非黏附性细胞从肝脏血管中清除。弃去被血液污染的灌注液。

现在以更高的流速进行灌注。在提高的流速和剪切力下进行强制灌注，可破坏MH白细胞与血管内壁之间的黏附，从而使MH白细胞从窦状壁上脱离。

收集并转移含有MH白细胞及其他血细胞的灌注液至新的离心管中。离心。重悬含有MH白细胞的沉淀物，用于后续分析。

为了收集小鼠边缘化肝白细胞，在呼吸停止后立即使用无菌剪刀和齿状组织镊在腹部正中切开切口，直至剑突。接着，用镊子提起胸骨，并小心剪开两侧的膈肌和肋骨笼。

用止血钳夹住胸骨，将肋骨向前折叠以暴露心肺复合体。将肠管移至动物左侧体外，暴露门静脉。随后，将一根30号针头连接至蠕动泵，并插入门静脉，进针位置位于脾静脉前方。

在膈肌上方剪断下腔静脉，以使灌注液从胸腔排出并收集。然后，以每分钟约3毫升的速度启动蠕动泵，收集胸腔积液中最初含有血液污染的数毫升灌注液。当收集到3毫升时，关闭泵。

然后，插入与10毫升注射器相连的21号蝶形针头，以每分钟最多4毫升的速度重新开始灌注，直至从胸腔收集到10毫升灌注液。当肝脏变为浅棕色时，停止灌注。接着，将灌注液转移至15毫升离心管中，离心后吸除上清液。