一种在小鼠模型中诱导眼表炎症的方法

眼表系统包括角膜、结膜以及相关的腺体网络。泪膜可保护眼表。

睑板腺分泌的脂质层可抑制泪膜水层的蒸发。眼表炎症会阻碍脂质分泌，从而导致干眼症。

为了在小鼠模型中诱导眼表炎症，取一只小鼠并腹腔注射免疫原溶液。该免疫原可激活辅助性T细胞（Th细胞），以引发免疫反应。活化的细胞通过体循环扩散至眼部。

孵育后，通过在眼部施加免疫原对眼表进行刺激，以引发增强的免疫反应。

抗原提呈细胞将免疫原呈递给活化的辅助性T细胞。辅助性T细胞的再次刺激会引发细胞因子和趋化因子的释放，从而导致眼表炎症。

趋化因子引起中性粒细胞的大量流入。细胞因子与中性粒细胞结合后，会激活细胞内的信号级联反应，产生活性氧（ROS）。生成的活性氧可导致胞质颗粒中抗菌蛋白的释放以及染色质的去凝集。

去凝集的染色质纤维和颗粒蛋白形成一种细胞外网状结构，称为聚集性中性粒细胞胞外诱捕网（aggNET）。过量的aggNET产生会堵塞睑板腺开口，从而阻止脂质分泌。

小鼠眼部表面炎症模型已准备好进行后续分析。

进行免疫原溶液腹腔注射时，用一只手抓住笼具的金属网，另一只手轻轻捏住7至9周龄未麻醉的C57 Black 6雌性小鼠尾巴，固定小鼠。然后用拇指和食指牢固夹住小鼠背部与颈部区域的皮肤，将尾巴及后肢固定于无名指和小指与手掌之间。保持小鼠头部朝下的姿势，将100 µL制备好的免疫原溶液注射至下腹部腔的右侧或左侧象限。

免疫后进行眼表激发实验时，将5微升卵清蛋白（ovalbumin，简称ova）或生理盐水滴加到麻醉小鼠的每只眼睛中，静置5分钟，使液滴被眼球吸收。随后，在激发完成后立即向眼表滴加50微升无菌生理盐水，收集眼表渗出物。