0 次观看 • 2:41 分钟 • July 8th, 2025
B细胞活化涉及B细胞表面的B细胞受体(BCR)对抗原的识别,从而引发免疫应答。
研究B细胞活化 体外从含有抗原和抗CD45R抗体的盖玻片开始,这些抗原和抗体通过静电相互作用固定在带正电荷的聚合物材料上。带负电荷的抗原和抗体与盖玻片上带正电荷的聚合物发生静电结合。
将包被的盖玻片覆盖在含有B细胞的培养基中并进行孵育。B细胞的跨膜蛋白CD45R与固定的抗体相互作用,促进细胞黏附。
黏附的B细胞表面的BCR与抗原相互作用,形成免疫突触——即细胞信号转导和抗原内吞的协调区域。这一过程促进细胞骨架重塑并启动细胞铺展,从而增加细胞表面与抗原的接触面积。
进一步的重塑导致与BCR偶联的抗原向免疫突触中心移动。这种细胞重排使得中心体重新定位至突触膜附近,从而引导包括溶酶体在内的细胞内细胞器向突触方向移动。
溶酶体与膜的融合导致抗原-BCR复合物的内化。内化的抗原被加工成肽段,装载到II类主要组织相容性复合体(MHC)分子上,最终在活化的B细胞表面呈递。
通过将抗BCR和B220加入PBS中,配制抗原溶液,使其终浓度分别为每毫升10微克和每毫升7.5微克。接着,将盖玻片置于已用石蜡膜包裹的24孔板盖子上,并加入40微升抗原溶液。密封后,在4摄氏度下过夜孵育。
开始盖玻片上的激活实验时,首先用 PBS 清洗盖玻片,并静置干燥几分钟。接着,加入 150,000 个 B 细胞,在 37 度条件下孵育不同时间点。无论使用磁珠还是抗原包被的载玻片进行激活,我们均建议从最长的时间点开始,然后依次进行较短的时间点实验。
本文展示了一种用于研究B细胞在免疫突触形成过程中细胞器动态变化的体外实验方案。该方法聚焦于B细胞受体(BCRs)识别抗原后的一系列事件,包括细胞骨架重塑、免疫突触形成、溶酶体移动、抗原内化以及抗原在MHC II类分子上的呈递。
在抗原包被的盖玻片上进行体外B细胞活化,可精确解析免疫突触的形成及细胞器动态,支持免疫学早期发现研究。该系统为抗原加工与呈递的机制提供了清晰的阐释,有助于免疫治疗开发中的靶点验证与风险评估。该方法增强了适应性免疫下游筛选及转化研究的预测可靠性。
该方法可融入从早期机制研究到临床前免疫学研究的整个发现过程,支持靶点验证和检测准备。
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
最后更新:29 八月 2026