抗原包被盖玻片上的B细胞活化

B细胞活化涉及B细胞表面的B细胞受体（BCR）对抗原的识别，从而引发免疫应答。

研究B细胞活化 体外从含有抗原和抗CD45R抗体的盖玻片开始，这些抗原和抗体通过静电相互作用固定在带正电荷的聚合物材料上。带负电荷的抗原和抗体与盖玻片上带正电荷的聚合物发生静电结合。

将包被的盖玻片覆盖在含有B细胞的培养基中并进行孵育。B细胞的跨膜蛋白CD45R与固定的抗体相互作用，促进细胞黏附。

黏附的B细胞表面的BCR与抗原相互作用，形成免疫突触——即细胞信号转导和抗原内吞的协调区域。这一过程促进细胞骨架重塑并启动细胞铺展，从而增加细胞表面与抗原的接触面积。

进一步的重塑导致与BCR偶联的抗原向免疫突触中心移动。这种细胞重排使得中心体重新定位至突触膜附近，从而引导包括溶酶体在内的细胞内细胞器向突触方向移动。

溶酶体与膜的融合导致抗原-BCR复合物的内化。内化的抗原被加工成肽段，装载到II类主要组织相容性复合体（MHC）分子上，最终在活化的B细胞表面呈递。

通过将抗BCR和B220加入PBS中，配制抗原溶液，使其终浓度分别为每毫升10微克和每毫升7.5微克。接着，将盖玻片置于已用石蜡膜包裹的24孔板盖子上，并加入40微升抗原溶液。密封后，在4摄氏度下过夜孵育。

开始盖玻片上的激活实验时，首先用 PBS 清洗盖玻片，并静置干燥几分钟。接着，加入 150,000 个 B 细胞，在 37 度条件下孵育不同时间点。无论使用磁珠还是抗原包被的载玻片进行激活，我们均建议从最长的时间点开始，然后依次进行较短的时间点实验。