一种建立右旋糖酐硫酸钠诱导小鼠结肠炎模型的技术

0 次观看3:20 分钟 • July 8th, 2025

为了在小鼠模型中诱导结肠炎(一种炎症性肠病),取一只饲养在笼中的小鼠。

将饮用水替换为葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液,DSS 是一种可诱导结肠炎的多糖。让小鼠摄入该溶液以建立结肠炎模型。

摄入后,DSS进入小鼠结肠的管腔。结肠具有较厚的黏液层,可在共生微生物与下方的上皮细胞单层之间形成物理屏障。

DSS 穿透黏液层,进入上皮细胞。在细胞内,DSS 改变紧密连接蛋白的表达,并诱导细胞凋亡,导致上皮层和黏膜屏障的破坏。这使得管腔微生物得以进入固有层——即含有常驻树突状细胞和巨噬细胞的下方组织。

免疫细胞识别微生物后,会激活下游信号通路,分泌促炎性细胞因子。这些细胞因子导致大量T细胞浸润,引发过度的免疫反应,从而造成炎症。

观察经处理的小鼠是否出现胃肠道紊乱和体重减轻,以判断结肠炎是否开始发生。

处死小鼠;手术分离整个结肠。将结肠分为近端、中段和远端三部分,并加入固定剂以保存组织。

该组织已准备好用于评估结肠炎的下游检测。

为诱导右旋糖酐硫酸钠(DSS)结肠炎,将常规饮用水替换为3% DSS溶液 广告 随意 连续七天每天测量每只小鼠的体重、DSS溶液消耗量和粪便产生情况。七天处理结束后,将小鼠置于仰卧位,用小剪刀在腹部正中线处做一个三厘米长的切口。

然后,使用镊子提起结肠,将其从周围的肠系膜中分离,并完整取出结肠,直至盲肠和直肠可见。在结肠-盲肠交界处和骨盆深部进行横断,分别游离近端和远端结肠。

测量并记录分离出的结肠长度,使用配备灌胃针的10毫升注射器,以10毫升冰冻PBS冲洗结肠,去除粪便和血液,直至流出液澄清。为进行组织学鉴定,将组织样本均分为近端、中段和远端三部分,并将组织在4%多聚甲醛中于4°C条件下固定过夜。