0 次观看 • 3:37 分钟 • July 8th, 2025
为了感染果蝇，首先准备一根充满矿物油的细径玻璃针。
使用 O 型圈和垫片将针头固定在纳米注射器的活塞上，以实现精确可控的注射，确保对果蝇造成的损伤最小。
释放矿物油，仅在针头中保留少量，作为细菌溶液与注射器之间的屏障。用细菌悬液加载针头。
将麻醉后的黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）置于腹侧朝上的位置。
将针头刺入果蝇的前腹部，穿透其外表皮层和上皮层。 将细菌悬液注入血腔——即含有血淋巴的体腔，血淋巴是一种富含营养的循环液体。
在血腔内，免疫细胞（称为血细胞）与脂肪体共同循环，脂肪体是一种具有模式识别受体的特化组织。
将注射后的果蝇放入含有培养基的试管中使其恢复。注射的细菌利用血淋巴中的营养物质进行增殖，增加细菌载量，并建立全身性感染。
脂肪体细胞受体与细菌抗原相互作用，触发免疫反应以产生抗菌肽，最终清除部分细菌。
循环血细胞具有吞噬活性，能够吞噬并降解少量细菌。然而，一些细菌可逃避宿主的免疫反应，在果蝇体内存活，从而建立细菌感染。
通过拉制硼硅酸盐玻璃毛细管制备玻璃针，并使用镊子折断针尖，形成直径为50微米的开口。接着，将密封O形环和白色垫片（大凹面朝外）安装到注射器的金属柱塞上。使用带有30号针头的注射器将矿物油注入玻璃针中。
然后，将装满的玻璃针插入夹头中，并在针的基部（距钝端1毫米处）套上较大的O形圈。将针滑入金属推杆，轻轻旋紧夹头直至固定。
排出注射器中的矿物油，仅在针头内保留少量矿物油，以在注射器与细菌悬液之间形成屏障。确保矿物油内部、细菌悬液内部以及两种液体之间均无气泡。然后，将注射器设定至所需的注射体积。小心地将毛细针尖插入一管无菌 PBS 中，按下注射器上的填充按钮，以填充注射器针头。
为了建立损伤对照，将麻醉后的果蝇在腹侧前腹部的腹外侧表面注射无菌 PBS。将注射后的果蝇放入装有新鲜培养基的新试管中，并将试管平放，以防止果蝇在从麻醉中恢复之前粘附到培养基上。接着，将注射器中剩余的无菌液体排出，并用同一根针头重新吸取细菌悬液。重复上述操作，对果蝇注射细菌悬液。