JoVE 实验百科全书
免疫学
0 次观看 • 2:49 分钟 • July 8th, 2025
取一只耳部脱毛的麻醉小鼠,在暴露的皮肤上涂抹测试抗原——即将半抗原溶于合适的载体溶液中。该载体溶液有助于半抗原穿透表皮最外层,到达下方的真皮层。
半抗原与皮肤蛋白结合,形成可被抗原提呈细胞(APC)识别的免疫原。APC吞噬后,对该免疫原进行加工并将其呈现在细胞表面。
抗原提呈细胞迁移至淋巴结,将免疫原呈递给初始T细胞并激活它们。活化的细胞分化为致敏的记忆T细胞——其中一部分亚群迁移至皮肤。
再次接触半抗原后,抗原提呈细胞将免疫原呈递给已致敏的T细胞,诱导促炎性细胞因子的释放。
细胞因子触发角质形成细胞和肥大细胞释放趋化因子,这些趋化因子与循环中的中性粒细胞结合,促进其渗出。渗出的中性粒细胞到达炎症部位。
细胞因子激活中性粒细胞,使其产生蛋白水解酶和活性氧物质,从而导致组织损伤并加剧炎症反应。
首先,通过腹腔注射麻醉剂混合物对小鼠进行麻醉,并通过脚趾夹捏试验确认麻醉效果充分。接着,将脱毛膏涂抹于双耳的背侧表面。一分钟后将其擦去,并用水清洗皮肤。
使用千分尺测量给药部位耳部的厚度。待小鼠从麻醉中恢复后,将其放回自己的笼子,并让其休息至少三天后再进行后续实验。
三天后,重新麻醉小鼠,再次测量耳部厚度,以确保耳部未受刺激。随后,将 12.5 µL 的 1.25% 奥沙唑酮溶液涂抹于右耳的两侧,将 12.5 µL 的丙酮-橄榄油溶剂溶液涂抹于左耳的两侧。
与往常一样,观察小鼠从麻醉中恢复。24小时后,在麻醉状态下再次测量耳朵厚度,以确认已成功诱导氧化唑酮所致的皮肤炎症。