一种用于研究针对细菌病原体免疫反应的小鼠皮肤伤口感染模型

取一只经基因改造并在中性粒细胞中表达荧光蛋白的小鼠，将其麻醉。剃除背部毛发并制作一个环形切口。切除切口处的皮肤以暴露筋膜——即位于其下的结缔组织层。

取一支含有金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）悬液的注射器——该细菌为一种经基因改造可产生生物发光的致病菌。将悬液注射至筋膜与下方组织之间，以建立局部伤口感染模型。

筋膜中基质细胞上的模式识别受体可识别细菌表面的病原体相关分子模式。这种结合会诱导促炎性细胞因子和趋化因子的释放，从而引发炎症反应。

趋化因子将循环中的中性粒细胞募集至感染部位。到达的中性粒细胞将细菌吞噬进入吞噬体，吞噬体与胞质颗粒融合，导致抗菌肽释放。

NADPH 氧化酶——一种酶复合物——在吞噬体膜上组装并产生活性氧（ROS）。抗菌肽和活性氧导致细菌降解。

作为应对反应，细菌会分泌毒力因子，破坏中性粒细胞膜的通透性，导致细胞裂解。细菌还会释放酶以促进纤维蛋白沉积，从而避免被吞噬作用清除。

免疫反应导致脓肿形成——一种包含细菌细胞、中性粒细胞和死亡细胞的纤维蛋白包膜。

记录中性粒细胞的荧光和细菌的生物发光，以可视化观察细菌与中性粒细胞的相互作用。

对于金黄色葡萄球菌（Staph aureus）接种，用50微升制备好的生物发光细菌接种液填充28号胰岛素注射器，并用手指将受伤动物的真皮层向一侧牵拉。将注射器几乎与组织平行持握，缓慢插入组织，直至感觉到阻力突然降低，表明已穿透筋膜。

将针头置于伤口中心，缓慢注入全部接种物。确认接种物在伤口中心形成气泡，且无明显泄漏或扩散，然后缓慢将注射器从动物体内抽出。随后，将动物放回笼中，给予保温和监测，直至完全恢复。