皮下注射细菌抗原以在小鼠模型中诱导全身性炎症

0 次观看3:52 分钟 • July 8th, 2025

为了诱导全身性炎症——一种广泛的炎症反应,首先将麻醉后的小鼠仰卧位固定。取一支含有分枝杆菌乳剂的注射器,该乳剂包含分枝杆菌抗原-佐剂储库——即抗原与佐剂混合物的局部油性储留物。

刺穿小鼠的表皮和真皮层,并在靠近腹股沟淋巴结的皮下部位注射抗原-佐剂乳剂。注射后,该储库持续向周围组织释放抗原,使免疫系统长时间暴露于抗原环境中。

组织中的抗原呈递细胞(APCs)与注射的分枝杆菌抗原相互作用,将其内化并加工成肽段。这些肽段随后通过主要组织相容性复合体呈递在APC表面,从而触发促炎性细胞因子和趋化因子的释放。

该过程可引发局部炎症,并触发淋巴管开放,促使免疫细胞(包括携带抗原的抗原呈递细胞)进入淋巴系统,并到达腹股沟淋巴结。

在淋巴结中,辅助性T细胞的T细胞受体与抗原提呈细胞表面的抗原相互作用并被激活。活化的T细胞释放促炎性细胞因子,这些细胞因子通过淋巴管运输并释放到其他多种组织中。

释放的促炎性细胞因子将免疫细胞募集至这些组织,引发全身性炎症。

首先,松开超声波破碎仪换能器主体的夹子,用70%酒精棉片清洁探头。然后,打开超声波破碎仪,通过旋转功率控制旋钮将功率设置为4。

接下来,为了制备该物质的细小悬浮液 分枝杆菌属 结核病 将H37Ra加入PBS中,将探针尖端浸入含有分枝杆菌粉末的PBS中,在冰上超声处理30秒,暂停30秒,重复操作,总时长5分钟,以充分分散粉末形成均匀悬浮液,同时避免液体过热。随后,向混合物中加入2.5毫升弗氏不完全佐剂,在冰上重复超声处理,直至乳剂形成类似牙膏状的稠度。

进行皮下注射时,用1毫升注射器抽取200至300微升分枝杆菌乳剂。排出注射器中的空气,并在间歇性倒置和轻弹的同时继续填充,直至注射器充满。

接下来,将皮下注射部位选择在6至10周龄、已麻醉的C57Black/6J小鼠的臀部背侧表面,或腹股沟淋巴结区域附近的腿部腹侧表面。小心插入针头,注意避免刺入肌肉层,并将50 µL乳剂注入皮下间隙。注射后不要立即拔出针头,以确保黏稠的乳剂完全注入。

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最后更新:22 八月 2026