0 次观看 • 3:52 分钟 • July 8th, 2025
为了诱导全身性炎症——一种广泛的炎症反应,首先将麻醉后的小鼠仰卧位固定。取一支含有分枝杆菌乳剂的注射器,该乳剂包含分枝杆菌抗原-佐剂储库——即抗原与佐剂混合物的局部油性储留物。
刺穿小鼠的表皮和真皮层,并在靠近腹股沟淋巴结的皮下部位注射抗原-佐剂乳剂。注射后,该储库持续向周围组织释放抗原,使免疫系统长时间暴露于抗原环境中。
组织中的抗原呈递细胞(APCs)与注射的分枝杆菌抗原相互作用,将其内化并加工成肽段。这些肽段随后通过主要组织相容性复合体呈递在APC表面,从而触发促炎性细胞因子和趋化因子的释放。
该过程可引发局部炎症,并触发淋巴管开放,促使免疫细胞(包括携带抗原的抗原呈递细胞)进入淋巴系统,并到达腹股沟淋巴结。
在淋巴结中,辅助性T细胞的T细胞受体与抗原提呈细胞表面的抗原相互作用并被激活。活化的T细胞释放促炎性细胞因子,这些细胞因子通过淋巴管运输并释放到其他多种组织中。
释放的促炎性细胞因子将免疫细胞募集至这些组织,引发全身性炎症。
首先,松开超声波破碎仪换能器主体的夹子,用70%酒精棉片清洁探头。然后,打开超声波破碎仪,通过旋转功率控制旋钮将功率设置为4。
接下来,为了制备该物质的细小悬浮液 分枝杆菌属 结核病 将H37Ra加入PBS中,将探针尖端浸入含有分枝杆菌粉末的PBS中,在冰上超声处理30秒,暂停30秒,重复操作,总时长5分钟,以充分分散粉末形成均匀悬浮液,同时避免液体过热。随后,向混合物中加入2.5毫升弗氏不完全佐剂,在冰上重复超声处理,直至乳剂形成类似牙膏状的稠度。
进行皮下注射时,用1毫升注射器抽取200至300微升分枝杆菌乳剂。排出注射器中的空气,并在间歇性倒置和轻弹的同时继续填充,直至注射器充满。
接下来,将皮下注射部位选择在6至10周龄、已麻醉的C57Black/6J小鼠的臀部背侧表面,或腹股沟淋巴结区域附近的腿部腹侧表面。小心插入针头,注意避免刺入肌肉层,并将50 µL乳剂注入皮下间隙。注射后不要立即拔出针头,以确保黏稠的乳剂完全注入。
本文展示了使用分枝杆菌抗原-佐剂乳剂在小鼠中诱导系统性炎症的方法,该模型可用于研究感染后葡萄膜炎。本方案详细描述了抗原乳剂的制备、在淋巴结附近进行皮下注射以及由此引发的免疫活化和广泛性炎症反应。该模型使研究人员能够探究感染后葡萄膜炎背后的免疫机制。
通过皮下注射分枝杆菌抗原-佐剂储库,在小鼠模型中诱导系统性炎症,可实现对与感染后炎症性疾病相关的免疫激活通路进行可控性研究。该方法为评估免疫细胞募集、细胞因子释放及系统性炎症反应提供了可重复的实验平台,有助于免疫学相关药物研发中的早期靶点验证和机制层面的风险排除。该模型在感染后葡萄膜炎中的转化研究价值,进一步提升了其在项目筛选和临床前候选分子评估中的应用意义。
该小鼠炎症模型可融入从发现到临床前研究的连续过程,架起早期免疫通路验证与转化候选物评估之间的桥梁。
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最后更新:22 八月 2026