0 次观看 • 3:29 分钟 • July 8th, 2025
为了建立佐剂诱导的关节炎小鼠模型，首先将小鼠麻醉并置于俯卧位。
取一支含有完全弗氏佐剂（CFA）的注射器，该佐剂为在油中悬浮的热灭活结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）混合物。将CFA注射至踝关节腔——即小腿骨与足骨之间充满滑液的区域——随后注射至关节周围组织，以诱导慢性炎症。
充满液体的腔隙由滑膜包围，滑膜由富含巨噬细胞和成纤维细胞的衬层——发挥免疫屏障功能——以及衬层下方的间质组织构成。
巨噬细胞识别细菌抗原后转化为吞噬表型，破坏屏障完整性。巨噬细胞还会释放趋化因子和细胞因子。释放的趋化因子介导循环中性粒细胞向感染部位募集。
细菌抗原的识别会激活中性粒细胞，导致脱颗粒。释放的基质金属蛋白酶和蛋白酶可引起软骨损伤及持续性炎症。
巨噬细胞分泌的细胞因子也会与滑膜成纤维细胞上的受体结合。细胞因子的结合和抗原识别可诱导成纤维细胞活化。
活化的成纤维细胞发生异常增殖，导致滑膜增生——进而引起滑液过度分泌和关节肿胀，这是关节炎的典型特征。
通过涡旋振荡至少五秒使完全弗氏佐剂悬浮均匀。然后，用胰岛素注射器吸取100 µL悬浮液。
麻醉后，标记选定的足爪，并从注射器中向踝关节空间的四个关节周围位点各注射20微升完全弗氏佐剂。将处理过的小鼠放入新的饲养盒中。监测小鼠，确保其正常呼吸，直至恢复活动能力。每隔三天，使用便携式厚度测量仪测量踝关节直径。
此外，根据关节炎评分标准评估关节炎严重程度。0 分为正常，无红斑和肿胀迹象。
1级为最轻度关节炎，表现为踝关节或跗骨部位的红斑和轻度肿胀。2级为中度关节炎，红斑和轻度肿胀从踝关节延伸至跗骨区域。3级为重度关节炎，红斑和中度肿胀从踝关节延伸至跖骨关节。4级为最严重关节炎，红斑和严重肿胀累及踝关节、足部及足趾，或出现肢体的关节强直。