0 次观看 • 3:04 分钟 • July 8th, 2025
为了建立Helicobacter pylori感染模型,首先准备一只经过麻醉的无病原小鼠。将小鼠牢固固定,以尽量减少操作过程中的移动。
取一支装有细菌悬液的注射器。将聚乙烯导管连接到注射器针头上,用于经胃灌注——一种将悬液直接送入胃内的技术。
将导管插入张开的口腔中央,以进入连接口腔与胃的肌肉管道——食管。轻柔地引导导管通过食管,直至到达胃部,并将细菌悬液直接注入其酸性环境中。
接种的细菌会分泌尿素酶,这是一种将尿素转化为氨和二氧化碳的酶。氨可提高胃内的pH值,中和酸性环境,从而使细菌得以存活。
这些细菌利用其鞭毛穿过保护性黏液层,从而到达胃上皮,在此处通过黏附素蛋白黏附于细胞。黏附后,这些细菌会释放毒力因子,破坏上皮细胞间的紧密连接。
这种结构破坏促进了细菌向更深层组织的侵入和定植,最终在胃部建立起受控的感染。
将细菌悬液加入15毫升聚苯乙烯管中,并用塑料接种环从每种培养物中转移一滴10至20微升的样品至各自的玻璃显微镜载玻片上。然后,在相差显微镜下以100倍放大倍数评估细菌的活力与运动性。
只有当大多数细菌呈杆状时,才使用 H. pylori 接种物。H. felis 接种物应主要含有螺旋状细菌,将接种物分别装入一次性1毫升注射器中。为每支注射器配备23号针头,并使用塑料石蜡膜将一次性聚乙烯导管固定在每根针头上。
接着,用手固定一只6至8周龄、无特定病原体且无螺杆菌的实验小鼠,抓住其颈部皮肤和尾巴,将一根导管插入张开的口腔中央。将导管沿尾侧方向朝向食道推进,同时伸展小鼠颈部,使导管易于经由食道进入胃部并避开气管,直至导管大部分或全部不可见,并感到一定阻力。然后,注入至少1 × 105个细菌,以确保在疾病病理过程中实现理想的定植效果。
本文描述了在小鼠中建立幽门螺杆菌感染模型的方法。该操作通过经口胃内灌注将细菌悬液直接递送至胃内,从而可研究细菌定植及其对胃组织的影响。
在小鼠中通过控制性经口胃内灌注建立幽门螺杆菌感染,可精确模拟宿主与病原体之间的相互作用,支持胃肠道疾病研究中的早期靶点验证和机制性风险排除。该方法提供可重复的感染参数,有助于提高临床前研究的预测可信度,并为抗感染和免疫调节项目的研发决策提供依据。
这种胃内感染模型连接了早期发现与临床前研究,能够支持以假设为导向的研究,并提供定量读数,用于先导化合物的筛选与验证。
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最后更新:29 八月 2026