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免疫学
0 次观看 • 2:54 分钟 • July 8th, 2025
取一只仰卧位的雌性小鼠,使其处于麻醉状态,并排空其膀胱。
取一支预先组装好的注射器,其上连接有导管,内含尿路致病性 Escherichia coli细菌悬液。
将导管经尿道口插入膀胱,并缓慢注入细菌悬液。
注射后,将小鼠置于仰卧位进行恢复。
细菌的菌毛与膀胱上皮细胞上的特异性受体结合,触发其在下方上皮细胞内的内化。
在膀胱上皮细胞内,细菌进行增殖,部分细菌呈现丝状形态,并形成致密的胞内细菌群落(IBCs)。
这些细胞内细菌集落(IBCs)表现出类似生物膜的特性,可保护细菌免受小鼠免疫防御系统的攻击,从而导致持续性感染。
随着时间推移,IBC破裂,将细菌释放到膀胱腔内;具有丝状形态的细菌会黏附于邻近的上皮细胞。
这会导致感染扩散,从而在雌性小鼠中引发尿路感染。
根据批准的实验方案麻醉雌性小鼠后,将动物置于仰卧位,并对下腹部施加中等压力,以排空膀胱中的尿液。充盈的膀胱在髂嵴之间的皮下触摸时感觉像一颗豌豆。
当膀胱排空时,用非优势手将拇指放在小鼠尾部,同一只手的另一手指放在小鼠腹部,向相反方向施加轻柔压力,以牢固固定小鼠。接着,将导管尖端垂直于小鼠尿道口放置。然后,施加轻柔压力,将导管沿尿道推进,直至导管接头处抵达尿道口,同时降低注射器,使其与操作台面平行。
导管放置到位后,用非优势手的一根手指轻轻牵拉小鼠腹部的皮肤朝向头部方向。注意尿道口不会移动;然而,如果导管插入的是阴道,则组织会随皮肤向上移动并偏离导管。将导管接头紧贴尿道口,缓慢注入50 µL细菌接种液。
缓慢的安装速率可最大限度减少尿液反流至肾脏。缓慢拔出导管以防止泄漏,然后将动物以仰卧位放回笼中。
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