通过创伤接种真菌建立水稻植株叶片感染

从一个含有带小伤口水稻叶片的培养皿开始，暴露其下层表皮。

加入含 Tween-20 的润湿溶液，为真菌生长创造有利环境。

放置一块菌丝块于 Magnaporthe grisea，由带有分生孢子的分生孢子梗组成  — 在伤口处产生生殖性真菌孢子。

将叶片置于光照周期条件下的湿润培养箱中孵育，以促进真菌生长。

孵育期间，分生孢子梗释放出孢子，这些孢子附着在暴露的表皮上并形成芽管。

菌丝管分化为圆顶状的附着胞，产生高膨压，形成尖锐的菌丝——即侵入栓。

侵入钉分泌降解细胞壁的酶，从而促进其进入表皮细胞，并分化为侵入性菌丝以获取营养。

菌丝通过胞间连丝在表皮细胞内生长并扩散  — 细胞间连接通道，并建立感染。

该真菌分泌毒素，导致叶片伤口附近细胞坏死和病斑形成，表明真菌感染。

使用解剖针在离体水稻叶片的主脉上刮擦出三条2至3厘米长的伤口。将刮擦后的叶片置于牙签上，并喷洒吐温-20溶液。接着，从含有每种M. griseus菌株的OTA平板上切取1/2 × 1/2厘米的菌丝块。将菌丝块放置于受伤的叶片上，并在25°C的湿润培养箱中孵育3至8天。

孵育结束后，根据国际水稻研究所提供的评分系统对病害病斑进行观察和评估。最后，拍摄感病叶片的照片，以评估测试菌株的致病性。