大鼠模型中肠系膜淋巴管插管采集淋巴液

0 次观看4:55 分钟 • July 8th, 2025

从一只腹部已暴露的经手术干预的大鼠开始。

找到肠系膜上淋巴管,该淋巴管垂直于右肾,位于肠系膜动脉前方并与之平行。

将直血管钳穿过肾周脂肪层。

将一根淋巴导管穿过肾周脂肪层,使一端靠近淋巴管,另一端伸出动物体外。

接下来,在淋巴管上做一个小切口。

用抗凝剂溶液填充导管,并将其插入淋巴管。

在导管内部,淋巴液含有多种生物分子,包括凝血因子,这些因子会触发一系列事件,最终导致血凝块形成。

然而,抗凝剂会结合凝血因子,抑制其活性。

这使得未凝固的淋巴液能够自由流过套管。

在入口孔上涂抹兽用粘合剂,以固定套管位置。

手术前一天,将套管剪至适当长度,并使用无菌手术刀片在每段管路的末端切出斜面。接下来,准备十二指肠内套管时,将套管末端回折形成环状,然后加热套管以在管壁上形成固定锚点。

手术当天,对麻醉后的成年大鼠右侧腹部、颈部以及左侧锁骨区域的毛发进行剃除,随后使用聚维酮碘溶液和70%乙醇依次进行三次无菌擦拭,清洁手术区域。

为了插管肠系膜淋巴管,将动物右侧朝上放置,使用无菌手术刀片从剑突开始沿直线向右侧腹侧做一条长约4厘米的切口,切口位于肋缘下方约2厘米处,切开腹壁肌层的表层。

将小肠向左腹壁下方回缩,并用两到三块浸有生理盐水的无菌纱布固定其位置。然后,将大鼠躯体架在置于动物背部下方、右肾水平位置的10毫升塑料注射器上,注射器呈水平放置,以帮助观察肠系膜淋巴管。

找到肠系膜上淋巴管,其直径约为0.5至1毫米,位于右肾外侧,紧邻暗红色搏动的肠系膜动脉的头端并与之平行。需要注意的是,在未禁食的大鼠中(如此处所示),肠系膜上淋巴管呈白色、不透明,比禁食大鼠中的更易于观察。

接着,将一对直血管钳穿过右肾下缘的肾周脂肪层,与肠系膜上淋巴管平行,并穿过下腔静脉正下方的结缔组织层。然后,用血管钳的尖端将淋巴导管从肾周脂肪层中穿过,使其一端紧邻肠系膜淋巴管,另一端在右肾水平处引出动物体外。

然后,在手术显微镜下使用钟表镊,从下端开始,通过钝性分离穿透覆盖的结缔组织和脂肪组织,分离肠系膜淋巴导管,注意避免损伤淋巴导管。当淋巴导管被充分游离后,用尖头镊的尖端在淋巴导管上刺一个小孔。确保淋巴导管插管内已完全充满抗凝剂溶液且无气泡后,用小型镊子将淋巴导管插管插入肠系膜淋巴导管内约2至4毫米。 通过 穿刺。

如果插管成功,可观察到肠系膜淋巴管游离收集端逐渐有淋巴液流出。此时,取少量氰基丙烯酸酯胶水滴加于淋巴管入口处,以固定插管,注意避免胶水过量导致血管堵塞。