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免疫学
0 次观看 • 2:36 分钟 • July 8th, 2025
首先,准备一只免疫缺陷小鼠。
使用带有弯曲针尖的装置,将肺癌细胞悬液注射到胸腔内。
癌细胞到达含有少量胸腔积液的胸膜。
这些癌细胞的受体可结合由胸膜内层间皮细胞产生的特定细胞外基质多糖,从而促进细胞附着于胸膜表面。
癌细胞会代谢这些多糖,导致癌细胞向表面迁移增加。它们还会释放蛋白水解酶和自分泌生长因子。
蛋白水解酶可降解细胞外基质蛋白,促进癌细胞侵袭。
由于缺乏功能性免疫系统以及自分泌生长因子的存在,癌细胞得以不受限制地增殖,形成肿瘤结节。
随着时间推移,肿瘤结节在胸膜腔内生长并扩散,破坏正常的生理液体平衡。
这会导致胸膜腔内液体积聚,这种状况称为胸腔积液。
为建立小鼠播散模型,使用聚苯乙烯泡沫制作一个塞子,并用70%乙醇进行消毒。将针头固定在塞子上,使针尖从塞子中伸出5毫米。用经70%乙醇清洁过的干净镊子或在经70%乙醇清洁的硬物上弯曲30号针头的尖端,并用注射器吸取100微升含1×106个目标肿瘤细胞的PBS溶液。
确认麻醉后的8至12周龄、体重19至21克的雌性纯合型裸鼠(athymic nude mouse)足底反射无反应。将针头经肋间间隙插入胸腔,上下移动针头以避免接触肋骨。当针尖穿过肋间间隙后,将注射器紧贴小鼠身体并注入全部靶细胞悬液。注射后,将小鼠滚动2至3次,使细胞在胸腔内均匀分布,并将小鼠放回笼中,持续监测直至完全恢复。
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