0 次观看 • 3:12 分钟 • July 8th, 2025
取一只预先用热灭活的结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)免疫过的小鼠,该小鼠已产生免疫应答,并生成了针对结核分枝杆菌(Mtb)的特异性T细胞。
滴入散瞳眼药水以扩大瞳孔,增强光线穿透,从而改善眼部成像效果。涂抹凝胶以防止角膜脱水。
用纱布包裹小鼠以维持体温,并将其置于光学相干断层扫描(OCT)系统中。
对眼睛进行成像,以获取前房(包括角膜和晶状体)和后房(包括视网膜)的横截面图像。
检查以确保无炎症存在。
将热灭活的结核分枝杆菌(Mtb)注入玻璃体腔。该免疫原扩散至整个眼球,引发免疫反应,导致预先形成的Mtb特异性T细胞及其他免疫细胞浸润,从而引起称为葡萄膜炎的炎症反应。
眼前段的OCT显示浸润的免疫细胞和角膜水肿,而眼后段的OCT提示玻璃体炎症。
根据炎症严重程度对OCT图像进行评分,以量化葡萄膜炎的进展。
麻醉小鼠后,滴入一滴2.5%去氧肾上腺素以散大瞳孔,注意避免过多液体流入鼻腔或口腔。2至3分钟后,用棉签吸去多余液体,并在角膜上覆盖0.3%羟丙基甲基纤维素凝胶。随后用一层手术纱布包裹小鼠以维持体温,将小鼠置于动物固定盒中,并通过咬合杆固定头部位置。
为了获取光学相干断层扫描(OCT)图像,打开OCT成像系统并启动成像软件。进行后房成像时,将OCT设备靠近眼球表面,注意避免镜头表面与眼睛接触。
当眼睛位置正确后,停止快速扫描,选择容积扫描协议,并使用定位选项启动扫描。对于后段成像,调整至视神经位于水平B超扫描对齐图像的中心位置,且视网膜与垂直对齐轴对齐。对于前段成像,调整位置,使角膜顶点在水平B超扫描对齐图像和垂直B超扫描对齐图像中均处于中心位置。最后,点击截图以获取容积扫描图像,然后点击保存。
本研究展示了一种在小鼠模型中利用光学相干断层扫描(OCT)对眼部免疫反应进行成像的方法。该方法通过注射灭活的结核分枝杆菌诱导葡萄膜炎,并利用OCT成像评估炎症反应。
光学相干断层扫描(OCT)可实现对临床前模型中眼部炎症的无创性、纵向评估,有助于在眼科药物研发中进行靶点验证和机制层面的风险排除。通过量化免疫细胞浸润和组织水肿,OCT 提供具有预测价值的读数,可优化“继续/终止”决策,降低葡萄膜炎治疗药物在后期研发中的失败风险。该成像方法通过客观、可重复的炎症评分,架起了基础生物学发现与转化研究之间的桥梁。
OCT成像适用于从靶点验证到先导化合物发现,再到临床前药效测试的整个发现过程,能够在每个阶段实现数据驱动的决策。
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最后更新:29 八月 2026