人类黏膜衬液中免疫介质水平的定量分析

将含有吸收的鼻黏膜衬液的滤纸置于冰上解冻，以防止样本降解。

该液体包含免疫介质，如趋化因子和细胞因子。

将滤纸浸入缓冲液中。将内容物转移至滤管中。离心以从滤纸中洗脱黏膜衬液。

将过滤后的鼻腔提取物加入已包被有介质特异性捕获抗体阵列的检测板中。

免疫介质与其相应的抗体结合。

加入用钌复合物标记的检测抗体，该抗体会与其相应的介质结合。 

加入含有三丙胺（TPA）的三碱基缓冲液。

当在电极两端施加电势时，钌配合物和三丙胺（TPA）会发生氧化反应。

生成的TPA自由基激发了钌配合物。

当回到基态时，钌配合物会发射光子。

测得的光强度与黏膜衬层液体中特异性免疫介质的浓度成正比。

进行气道免疫介质定量时，将最多10个来自-80摄氏度储存的样本置于冰上解冻，并记录其编号。待样本完全解冻后，将每位受试者的两张滤纸分别浸入每张滤纸150 µL的新鲜配制缓冲液中。

每25毫升缓冲液原液中加入一片完整的蛋白酶抑制剂片剂。将样品转移至摇床中，在400 RPM条件下振荡5分钟。将缓冲液和滤纸转移至各独立的醋酸纤维素滤柱中。

离心样品，使过滤后的鼻腔提取物聚集在微量离心管底部。随后，移除滤杯，将离心管置于冰上。接下来，将150 µL鼻腔提取物分装至低蛋白结合储存板的各个孔中，并将储存板于-80 °C保存至分析前。然后，根据标准检测方案，采用基于高灵敏度电化学发光的多重阵列法测定鼻腔免疫介质目标物的浓度。